【摘 要】
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为了获得杉木木质化过程中特异表达的基因,本研究利用抑制差减杂交技术,以杉木突变体独干杉无性系为测试方（Tester）,正常的句容0号无性系为驱动方（Driver）,构建了正向差减文库,获
【机 构】
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南京林业大学林木遗传与基因工程江苏省和国家林业局重点实验室
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为了获得杉木木质化过程中特异表达的基因,本研究利用抑制差减杂交技术,以杉木突变体独干杉无性系为测试方（Tester）,正常的句容0号无性系为驱动方（Driver）,构建了正向差减文库,获得了618个克隆。利用通用引物T7和SP6进行PCR及EcoRⅠ酶切鉴定文库重组子,同时,利用点杂交技术,以正向差减、反向差减及未差减的测试方和驱动方四种探针,进行了进一步的筛选阳性克隆。用定量PCR对结果进行了初步验证。260个单一ESTs中60%的与已知蛋白具有显著同源性,可分为4个主要类别：新陈代谢、细胞壁生成和结构
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