hCGβ和hCGβ-C3d3融合蛋白在CHO细胞中的分泌性表达、鉴定与纯化

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kingjongz

【摘要】

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目的:构建带有6个组氨酸纯化标签的hCGβ和hCGβ-C3d3融合蛋白的分泌型真核表达质粒,在CHO细胞中获得具有生物学活性的重组蛋白的高效表达.方法:利用高效真核表达载体phCMV1,

【作者】

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王秀丽李大金袁敏敏王明雁朱影孟毅

【机构】

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复旦大学附属妇产科研究所

【出处】

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中国免疫学杂志

【发表日期】

：

2004年11期

【关键词】

：

HCGΒ hCGβ-C3d3 6His CHO phCMV1 hCGβ hCGβ-C3d3 6His CHO phCMV1

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目的:构建带有6个组氨酸纯化标签的hCGβ和hCGβ-C3d3融合蛋白的分泌型真核表达质粒,在CHO细胞中获得具有生物学活性的重组蛋白的高效表达.方法:利用高效真核表达载体phCMV1, 构建phCMV1-6His-hCGβ和phCMV1-6His-hCGβ-C3d3,脂质体法转染CHO细胞,G418(800μg/ml)筛选抗性克隆.放射免疫法检测抗性克隆培液中hCGβ表达量,Western blotting和Raji细胞免疫化学法鉴定hCGβ-C3d3融合蛋白.用镍柱和凝胶过滤层析纯化表达产物.结果:酶

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