表达HCV core-Ant的重组慢病毒的构建

来源 :西安交通大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：romotic

【摘要】

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目的构建表达HCV核心区的重组慢病毒，以探讨HCV感染后该病毒核心蛋白对肝脏干细胞转分化的影响。方法利用PCR体系延伸互为模板的引物，通过T载体克隆法获得HCV core—Ant基因克

【作者】

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马列婷李砚王亚文

【机构】

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西安交通大学医学院第一附属医院检验科

【出处】

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西安交通大学学报：医学版

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

丙型肝炎病毒核心蛋白重组慢病毒分子克隆 HCV core protein recombinant lentiviral vector molecular

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（No.30571648）

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目的构建表达HCV核心区的重组慢病毒，以探讨HCV感染后该病毒核心蛋白对肝脏干细胞转分化的影响。方法利用PCR体系延伸互为模板的引物，通过T载体克隆法获得HCV core—Ant基因克隆，酶切后连入pLenti6／V5-D-TOPO质粒，得到pLenti6／V5-D-HCVcore—Ant，连同pLP／VSVG、pLP1和pLP2四质粒共转染293ET细胞，获得了表达HCVcore—Ant重组慢病毒。收集病毒上清，大量扩增，用免疫组化法检测目的基因在Hela细胞的表达。用类似的方法构建了表达EGFP的重

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