【摘 要】
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目的 研究非抗凝肝素衍生物（ROH）对脓毒症小鼠高凝状态的影响和可能的机制。方法 体外实验采用生色底物法检测ROH通过抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）及肝素辅因子Ⅱ（HCⅡ）对凝血酶（Ⅱa）活性的抑制作用。体内实验，将小鼠随机分为4组：正常组、模型组、肝素组、ROH组，每组5只。除正常组外，其余3组小鼠均腹腔注射脂多糖（LPS）溶液(15 mg·kg-1)复制脓毒症模型。肝素组和ROH组分别于造模前15 mi
【机 构】
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山东大学齐鲁医学院药学院教育部天然产物化学生物学重点实验室生化与生物技术药物研究所
【基金项目】
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山东省科技重大专项（重大关键技术）基金资助项目（2015ZDJS04002）；
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目的 研究非抗凝肝素衍生物（ROH）对脓毒症小鼠高凝状态的影响和可能的机制。方法 体外实验采用生色底物法检测ROH通过抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）及肝素辅因子Ⅱ（HCⅡ）对凝血酶（Ⅱa）活性的抑制作用。体内实验，将小鼠随机分为4组：正常组、模型组、肝素组、ROH组，每组5只。除正常组外，其余3组小鼠均腹腔注射脂多糖（LPS）溶液(15 mg·kg-1)复制脓毒症模型。肝素组和ROH组分别于造模前15 min尾静脉注射400 U·kg-1肝素溶液和30 mg·kg-1 ROH溶液。正常组和模型组则尾静脉注射等体积的生理盐水。建模5 h后，采用剪尾法测定出血时间；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中D-二聚体、组织因子途径抑制物（TFPI）、组织因子（TF）、可溶性血栓调节蛋白（sTM）的含量。结果 体外检测发现ROH不依赖ATⅢ抑制Ⅱa活性，但能通过激活HCⅡ发挥拮抗Ⅱa的活性。正常组、模型组、肝素组、ROH组小鼠尾出血时间分别为（6.56±2.72）,（1.68±0.62）,（13.93±2.39）和（13.08±2.65） min;这4组小鼠血浆中D-二聚体的含量分别为（1.16±0.19）,（1.46±0.18）,（1.26±0.13）和（1.23±0.19） ng·mL-1。造模11 h后，这4组的TFPI含量分别为（38.97±1.49）,（39.25±3.73）,（42.51±2.66）和（42.83±4.75）μg·L-1;这4组的TF含量分别为（153.07±15.49）,（172.84±3.31）,（147.26±22.45）和（161.60±16.07） ng·L-1;这4组的sTM含量分别为（5.87±0.75）,（6.58±0.39）,（6.39±0.64）和（5.66±0.63） ng·mL-1。与正常组比较，模型组尾部出血时间显著缩短（P＜0.05）,肝素组和ROH组相较于模型组小鼠的尾出血时间均显著延长，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。造模后，各组TFPI、TF及sTM较正常组均有显著升高或呈升高趋势，在11 h, ROH组sTM含量明显低于模型组（P＜0.05）。结论 体外非抗凝的ROH可以通过抑制凝血激活和改善生理抗凝作用，发挥改善脓毒症导致小鼠高凝状态的作用。
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