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摘 要：本文主要分析了HPLC法测定伊曲康唑片的含量以及相关的物质，在研究的过程中主要采用的是液相色谱柱和乙腈磷酸二氢钾，其浓度为0.01mol/L，其中含有0.2%的三乙胺，在研究的过程中还要使用磷酸将其PH值调整到3.5.将其作为流动相，检测的波长为261nm，流速为1ml/min，伊曲康唑与它相邻杂质峰能够体现出非常好的分离效果。伊曲康唑在0.174-348.8μg/ml的浓度范围之内都能展现出非常好的线形关系，r2=0.9999，回收率较高。这种方法操作简单，同时在测定效果上也能展现出明显的优势。可以使用在伊曲康唑片含量和相关物质的测定中。
關键词：伊曲康唑；有关物质；高效液相色谱法
伊曲康唑是一种非常常见的抗真菌类药物，它在应用的过程中能够展现出非常好的广谱抗菌活性和耐受性。当前在国内的市场上比较常见的有胶囊和口服液，而片剂是进口产品，为了能够更加全面的对生产、运输和贮藏过程中可能会受到影响的相关物质进行检查，在研究的过程中采用了HPLC法来操作。
1 仪器与试剂
ShimadzuClass-10VPDAD和Agilent1100系列高效液相色谱仪，乙腈为色谱纯（MERCK），其余试剂均为分析纯。伊曲康唑对照品（原料精制而得）、伊曲康唑片样品（北京韩美药品有限公司）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：DiamonsilTMC18（4.6mm×250mm，5μm），流动相：乙腈-磷酸二氢钾（0.01molL-1磷酸二氢钾的水溶液，含0.2%三乙胺，用磷酸调pH至3.5）（65∶35）；检测波长：261nm；流速：1mlmin-1；进样量：10μl。柱温：30℃。理论塔板数按伊曲康唑峰计算，应不低于2000。
2.2 方法的专属性
2.2.1 按照处方的要求分别取辅料和伊曲康唑对照品以及伊曲康唑片的细粉适量，使用流动相对其进行溶解并稀释，将其制成100μg/ml的溶液，之后再分别取上述的三种溶液每个都是10μl，之后要按照上述的色谱条件进行测定，测定的结果是肥料、伊曲康唑对照品和伊曲康唑的色谱峰都能展现出非常好的分离效果。
2.2.2 酸破坏。分别取伊曲康唑的对照品适量，将其用浓度为1mol/L的盐酸溶液进行充分的溶解之后，在室温条件下放置5个小时，在这一过程中还要用浓度为1mol/L的氢氧化钠对溶液进行中和处理，同时还要按照以上的色谱条件对其进行全面的测定，结果是使伊曲康唑产生了若干个杂质主峰，主要成分和杂质峰分离的效果比较好。
2.2.3 碱破坏。分别取适量的伊曲康唑精制品，加入一定的流动相对其进行溶解处理，加入质量分数为10%的过氧化氢溶液，在5个小时以后要加入适量的流动相，将其稀释5倍，按照上文当中所说的色谱条件对其进行测定处理，结果是遭到氧化破坏的伊曲康唑和其他杂质峰之间具有良好的分离性能。
2.2.4 氧化破坏。分别取出适量的伊曲康唑对照品，使用适量的流动相对其进行溶解处理，加入一定数量的质量分数为10%的过氧化氢溶液，在5个小时之后要使用流动相将其稀释5倍，遭到氧化破坏的伊曲康唑和杂质峰分离的状况非常好。
2.2.5 高温破坏。分别取一定数量的温度条件为60℃，放置了10天的伊曲康唑对照品，用流动相将其进行稀释处理，将其浓度保持在100μg/ml，按照相同的色谱条件对其开展测定工作。结果：受到高温破坏的伊曲康唑和其杂质峰分离状况比较明显，分离的效果较好。
2.3 线性关系考察
精密称取伊曲康唑对照品适量，加流动相制成348.8μgml-1浓度的溶液，再用流动相分别稀释成0.1744、0.872、1.744、3.488、8.72、17.44、34.88、69.76、87.2、174.4及348.8μgml-1浓度的溶液，照上述色谱条件进行测定，记录色谱图。以样品浓度C对峰面积A进行回归，回归方程为：A=30.101×C+11.54，r2=0.9999；线性范围为：0.174～348.8μgml-1。
2.4 精密度试验
精确称取适量的伊曲康唑对照品，将其用流动相溶解同时将其稀释成浓度为100μg/ml和1μg/ml的溶液，重复进样5次，对其峰面积进行计算，其峰面积平均值是25.3800和2520.1061。RSD分别是0.38%个0.35%，进样次数为5次。
讨论：
伊曲康唑的流动相溶液在波长为261nm的时候吸收最为明显，同时在二极管阵列检测图谱提取中得到的图像显示，伊曲康唑和其他将积产物吸收量最大的波长都是261nm附近的位置，所以在研究操作的过程中，选择261nm当做是检测波长。
2.5 稳定性试验
取精密度试验项下的两种溶液，分别在0、2、6、12、24小时内测定，峰面积的平均值分别为25.7523和2535.1000，RSD分别为0.38%和0.32%（n=5）。
2.6 检出限
取线性关系考察项下溶液依次稀释后进行测定，伊曲康唑在浓度为0.42μgml-1，进样0.1μl，信噪比（S/N）>3，最低检出量为0.042ng。
2.7 回收率试验
精密称取伊曲康唑对照品9份，按处方比例加入辅料，制成含伊曲康唑100μgml-1的溶液，滤过；照上述色谱条件进行测定，用回归方程计算回收率。结果见表1。
表1 伊曲康唑的回收率试验结果
2.8 测定方法及结果
2.8.1 含量测定。取本品重量差异项下的细粉适量，精密称定，加流动相溶解并制成约含伊曲康唑100μgml-1的溶液，照高效液相色谱法进行测定，取10μl注入液相色谱仪，记色谱图；另取伊曲康唑对照品适量，同法测定，按外标法计算，结果见表2。
2.8.2 有关物质检查。取含量测定项下的溶液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量加甲醇稀释成含伊曲康唑1.0μgml-1的溶液，作为对照溶液。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使伊曲康唑峰高约为记录仪满量程的20%～25%，再取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至伊曲康唑峰保留时间的2倍，供试品溶液如显杂质峰，各杂质峰面积之和不得大于对照溶液峰面积的2倍（2.0%），结果见表2。
表2 伊曲康唑片含量及有关物质测定结果
3 讨论
伊曲康唑的流动相溶液在261nm波长处有最大吸收，二极管阵列检测图谱提取得到的UV图中显示：伊曲康唑和其主要降解产物的最大吸收波长均在261nm附近，故选择261nm作为本色谱条件的检测波长。
参考文献
[1]苏习刚，陈肖，陈小平.伊曲康唑片处方工艺及质量检测标准的研究[J].安徽医药，2009（5）.
[2]宋笑丹，唐景玲，邸哲婷，魏华，吴琳华.RP-HPLC法测定自乳化释药系统中伊曲康唑的含量[J].药物分析杂志，2009（7）.
[3]江峥，朱利平，于存静，郁韵秋.高效液相色谱法测定隐球菌性脑膜炎患者脑脊液中两性霉素B和伊曲康唑含量（英文）[J].复旦学报（医学版），2008（6）.
關键词：伊曲康唑；有关物质；高效液相色谱法
伊曲康唑是一种非常常见的抗真菌类药物，它在应用的过程中能够展现出非常好的广谱抗菌活性和耐受性。当前在国内的市场上比较常见的有胶囊和口服液，而片剂是进口产品，为了能够更加全面的对生产、运输和贮藏过程中可能会受到影响的相关物质进行检查，在研究的过程中采用了HPLC法来操作。
1 仪器与试剂
ShimadzuClass-10VPDAD和Agilent1100系列高效液相色谱仪，乙腈为色谱纯（MERCK），其余试剂均为分析纯。伊曲康唑对照品（原料精制而得）、伊曲康唑片样品（北京韩美药品有限公司）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：DiamonsilTMC18（4.6mm×250mm，5μm），流动相：乙腈-磷酸二氢钾（0.01molL-1磷酸二氢钾的水溶液，含0.2%三乙胺，用磷酸调pH至3.5）（65∶35）；检测波长：261nm；流速：1mlmin-1；进样量：10μl。柱温：30℃。理论塔板数按伊曲康唑峰计算，应不低于2000。
2.2 方法的专属性
2.2.1 按照处方的要求分别取辅料和伊曲康唑对照品以及伊曲康唑片的细粉适量，使用流动相对其进行溶解并稀释，将其制成100μg/ml的溶液，之后再分别取上述的三种溶液每个都是10μl，之后要按照上述的色谱条件进行测定，测定的结果是肥料、伊曲康唑对照品和伊曲康唑的色谱峰都能展现出非常好的分离效果。
2.2.2 酸破坏。分别取伊曲康唑的对照品适量，将其用浓度为1mol/L的盐酸溶液进行充分的溶解之后，在室温条件下放置5个小时，在这一过程中还要用浓度为1mol/L的氢氧化钠对溶液进行中和处理，同时还要按照以上的色谱条件对其进行全面的测定，结果是使伊曲康唑产生了若干个杂质主峰，主要成分和杂质峰分离的效果比较好。
2.2.3 碱破坏。分别取适量的伊曲康唑精制品，加入一定的流动相对其进行溶解处理，加入质量分数为10%的过氧化氢溶液，在5个小时以后要加入适量的流动相，将其稀释5倍，按照上文当中所说的色谱条件对其进行测定处理，结果是遭到氧化破坏的伊曲康唑和其他杂质峰之间具有良好的分离性能。
2.2.4 氧化破坏。分别取出适量的伊曲康唑对照品，使用适量的流动相对其进行溶解处理，加入一定数量的质量分数为10%的过氧化氢溶液，在5个小时之后要使用流动相将其稀释5倍，遭到氧化破坏的伊曲康唑和杂质峰分离的状况非常好。
2.2.5 高温破坏。分别取一定数量的温度条件为60℃，放置了10天的伊曲康唑对照品，用流动相将其进行稀释处理，将其浓度保持在100μg/ml，按照相同的色谱条件对其开展测定工作。结果：受到高温破坏的伊曲康唑和其杂质峰分离状况比较明显，分离的效果较好。
2.3 线性关系考察
精密称取伊曲康唑对照品适量，加流动相制成348.8μgml-1浓度的溶液，再用流动相分别稀释成0.1744、0.872、1.744、3.488、8.72、17.44、34.88、69.76、87.2、174.4及348.8μgml-1浓度的溶液，照上述色谱条件进行测定，记录色谱图。以样品浓度C对峰面积A进行回归，回归方程为：A=30.101×C+11.54，r2=0.9999；线性范围为：0.174～348.8μgml-1。
2.4 精密度试验
精确称取适量的伊曲康唑对照品，将其用流动相溶解同时将其稀释成浓度为100μg/ml和1μg/ml的溶液，重复进样5次，对其峰面积进行计算，其峰面积平均值是25.3800和2520.1061。RSD分别是0.38%个0.35%，进样次数为5次。
讨论：
伊曲康唑的流动相溶液在波长为261nm的时候吸收最为明显，同时在二极管阵列检测图谱提取中得到的图像显示，伊曲康唑和其他将积产物吸收量最大的波长都是261nm附近的位置，所以在研究操作的过程中，选择261nm当做是检测波长。
2.5 稳定性试验
取精密度试验项下的两种溶液，分别在0、2、6、12、24小时内测定，峰面积的平均值分别为25.7523和2535.1000，RSD分别为0.38%和0.32%（n=5）。
2.6 检出限
取线性关系考察项下溶液依次稀释后进行测定，伊曲康唑在浓度为0.42μgml-1，进样0.1μl，信噪比（S/N）>3，最低检出量为0.042ng。
2.7 回收率试验
精密称取伊曲康唑对照品9份，按处方比例加入辅料，制成含伊曲康唑100μgml-1的溶液，滤过；照上述色谱条件进行测定，用回归方程计算回收率。结果见表1。
表1 伊曲康唑的回收率试验结果
2.8 测定方法及结果
2.8.1 含量测定。取本品重量差异项下的细粉适量，精密称定，加流动相溶解并制成约含伊曲康唑100μgml-1的溶液，照高效液相色谱法进行测定，取10μl注入液相色谱仪，记色谱图；另取伊曲康唑对照品适量，同法测定，按外标法计算，结果见表2。
2.8.2 有关物质检查。取含量测定项下的溶液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量加甲醇稀释成含伊曲康唑1.0μgml-1的溶液，作为对照溶液。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使伊曲康唑峰高约为记录仪满量程的20%～25%，再取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至伊曲康唑峰保留时间的2倍，供试品溶液如显杂质峰，各杂质峰面积之和不得大于对照溶液峰面积的2倍（2.0%），结果见表2。
表2 伊曲康唑片含量及有关物质测定结果
3 讨论
伊曲康唑的流动相溶液在261nm波长处有最大吸收，二极管阵列检测图谱提取得到的UV图中显示：伊曲康唑和其主要降解产物的最大吸收波长均在261nm附近，故选择261nm作为本色谱条件的检测波长。
参考文献
[1]苏习刚，陈肖，陈小平.伊曲康唑片处方工艺及质量检测标准的研究[J].安徽医药，2009（5）.
[2]宋笑丹，唐景玲，邸哲婷，魏华，吴琳华.RP-HPLC法测定自乳化释药系统中伊曲康唑的含量[J].药物分析杂志，2009（7）.
[3]江峥，朱利平，于存静，郁韵秋.高效液相色谱法测定隐球菌性脑膜炎患者脑脊液中两性霉素B和伊曲康唑含量（英文）[J].复旦学报（医学版），2008（6）.