【摘 要】
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为确定人顶体蛋白酶原基因特异的基因表达调控和蛋白分选的序列,从血白细胞中抽提人基因组,聚合酶链式反应(PCR)扩增该基因5侧翼序列和第1外显子.将扩增获得的1 3 Kb片段克隆
【机 构】
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第二军医大学附属长海医院全军生殖研究中心,第二军医大学分子遗传学开放实验室
【基金项目】
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中国博士后科学基金;上海市博士后科学基金
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为确定人顶体蛋白酶原基因特异的基因表达调控和蛋白分选的序列,从血白细胞中抽提人基因组,聚合酶链式反应(PCR)扩增该基因5侧翼序列和第1外显子.将扩增获得的1 3 Kb片段克隆到pGEM-T中,经酶切鉴定和DNA序列测定确定为人顶体蛋白酶基因片段.将上述基因片段克隆到pGEM-4Z中,适当酶切后与pSV-β-Galactosidase中经酶切去除SV40早期启动子的两片段连接,最终获得人顶体蛋白酶基因的5侧翼序列和第1外显子与LacZ的融合基因载体,以及人顶体蛋白酶原基因5侧翼序列与LacZ的融合基因载体.
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