人白血病仰制因子基因在酵母中的融合表达

来源 :中山大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ee320

【摘要】

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用PCR突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失, 并与质粒pPICZαA 上的%myc%表位及6个组氨酸处于同一读码框,构建融合表达载体pPICZαA-hLIF+M.通过氯化锂化学转

【作者】

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王全忠杨林欧阳菁龙綮新王章

【机构】

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中山大学生物医药中心

【出处】

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中山大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2001年5期

【关键词】

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人白血病抑制因子基因毕赤酵母融合表达生物活性测定 human leukemia inhibitory factor gene Pichica pastor

【基金项目】

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国家自然科学基金

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用PCR突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失, 并与质粒pPICZαA 上的%myc%表位及6个组氨酸处于同一读码框,构建融合表达载体pPICZαA-hLIF+M.通过氯化锂化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母X-33的基因组DNA中,转化子经甘油增菌和甲醇诱导,实现了hLIF基因在毕赤酵母表达载体系统中的表达.SDS-PAGE检测和Western blot分析结果表明在相对分子质量为61 000处有一条人白血病抑制因子特异蛋白带.凝胶薄层扫描分析结果显示表达的目的蛋白占培养液上清总蛋白的

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