【摘 要】
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目的 采用RNA干扰技术特异性阻断前列腺癌细胞PC-3中Aurora-A的表达,观察其对肿瘤细胞生长的抑制作用.方法 采用免疫组化方法检测Aurora-A在前列腺癌细胞中的表达.体外化学合
【机 构】
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潍坊医学院,山东潍坊,2610531;山东医学高等专科学校,山东临沂,276000;
【基金项目】
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山东省中青年科学家科研奖励基金;
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目的 采用RNA干扰技术特异性阻断前列腺癌细胞PC-3中Aurora-A的表达,观察其对肿瘤细胞生长的抑制作用.方法 采用免疫组化方法检测Aurora-A在前列腺癌细胞中的表达.体外化学合成特异针对Aurora-A基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),以脂质体转染前列腺癌细胞系PC-3,荧光显微镜及流式细胞仪确定最佳转染效率.MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率.RT-PCR和Western-blot检测Aurora-A mRNA和蛋白的表达.结果 Aurora-A蛋白主要表达于PC-3细胞胞浆中；脂质体的最佳转染效率高于90％；siR-NA1组24h、48h、72h细胞增殖抑制率分别为(0.377±0.035)％、(0.597±0.065)％、(0.749±0.061)％,与各组比较均有显著性差异；siRNA1组细胞凋亡率为(50.593±1.208)％,与各组比较均有显著性差异；RT-PCR检测siRNA1组Aurora-A mRNA相对值为(1.354±0.087),与各组比较均有显著性差异；Western-blot检测显示siRNA 1组蛋白表达量明显低于对照组.结论 应用RNAi技术靶向沉默Aurora-A基因可以下调Aurora-A mRNA及蛋白的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.
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