【摘 要】
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目的:探讨人参多糖对D?半乳糖(D?Gal)诱导的大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞衰老损伤后自噬和相关信号途径的影响.方法:将PC12细胞分为正常对照组、模型组、人参多糖组.除正常对照组外,其余各组用含20 mg/mL D?Gal的培养基损伤24 h;人参多糖组加入终浓度分别为65、75μg/mL人参多糖作用24 h.CCK?8法检测人参多糖对细胞活力的影响;β?半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老;流式细胞仪检测细胞周期、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(MMP);Seahorse代谢分析系统结合ATP生成量评估线
【机 构】
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长春中医药大学/吉林省人参科学研究院,吉林 长春130117
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目的:探讨人参多糖对D?半乳糖(D?Gal)诱导的大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞衰老损伤后自噬和相关信号途径的影响.方法:将PC12细胞分为正常对照组、模型组、人参多糖组.除正常对照组外,其余各组用含20 mg/mL D?Gal的培养基损伤24 h;人参多糖组加入终浓度分别为65、75μg/mL人参多糖作用24 h.CCK?8法检测人参多糖对细胞活力的影响;β?半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老;流式细胞仪检测细胞周期、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(MMP);Seahorse代谢分析系统结合ATP生成量评估线粒体功能;免疫蛋白印迹法检测自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3B(LC3B?Ⅱ)、泛素结合蛋白P62(P62)]和自噬相关信号通路Parkin、PINK 1蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,D?Gal可引起细胞衰老,表现为细胞活力降低,β?半乳糖苷酶阳性染色率增加,细胞周期G1阻滞;与模型组比较,人参多糖75μg/mL组线粒体膜电位升高,活性氧降低,ATP及最大呼吸量升高(P<0.05～P<0.01);与模型组比较,人参多糖组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ表达水平上升,P62表达下降(P<0.001),Parkin、PINK 1蛋白的表达趋势与LC3Ⅱ/Ⅰ的结果一致(P<0.05～P<0.001).结论:人参多糖可能通过影响PINK1/Parkin途径调控线粒体自噬,维系线粒体稳态改善D?Gal引起的PC12细胞衰老,保护受损细胞.
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目的:研究西藏猫乳Rhamnella gilgitica Mansf.et Melch.心材的化学成分.方法:采用正反相硅胶柱层析、Sephadex LH?20柱层析、制备型高效液相等色谱分离方法对西藏猫乳的乙酸乙酯部位进行分离纯化,并结合核磁共振、质谱等波谱学方法进行结构鉴定.结果:从西藏猫乳中分离得到9个化合物,分别鉴定为:(-)?南烛木树脂酚(1)、儿茶素(2)、(-)?表儿茶素(3)、柚皮素(4)、山柰酚(5)、鼠李柠檬素(6)、芹菜素(7)、(+)?丁香脂素(8)、(+)?皮树脂醇(9).结论:
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