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洋桔梗，又名草原龙胆，为草原龙胆属1～2年生草本植物，原产美国、墨西哥，因其花型优美，花色各异，深受世界人民的喜爱，用于生产栽培的洋桔梗种苗主要从日本等国进口，成本高，风险大，受制于人，进而影响了我国洋桔梗切花的大规模推广种植。因此，我们开展了洋桔梗组培培养技术研究，旨在通过组培快繁技术，探寻洋桔梗的快速繁殖、规模化生产以及珍贵种质资源的保存的新途径。
1 试验材料
供试材料为洋桔梗品种“丽莎” ，由辽宁省农业科学院花卉研究所提供。
2 试验方法
采集洋桔梗健康植株的叶片，将其置于烧杯中，按程序进行漂洗和消毒。将叶片横切成2～3段，整理成5mm×5mm大小的叶盘后，接种于不定芽诱导培养基中（表1、表2）。诱导基本培养基以MS为基本培养基，附加细胞分裂素（BA、TDZ、2-ip），生长素（NAA），蔗糖30 g/L，琼脂2.5g/L，培养基的pH值为5.8。每个处理组合接种叶盘30片，重复3次，培养条件为25℃，光照16h/d。40 d后统計诱导率，并观察记录幼苗的生长状况
将叶盘上诱导产生的长约1.5～2cm的不定芽接种到生根培养基中，生根培养基以1/2MS为基本培养基，附加不同生长素（见表3），40 d后统计生根率。
选取健壮的生根植株和玻璃化植株各30株，洗净根部琼脂，然后将其移栽到装有花卉专用营养土的钵中，覆盖透明薄膜，于幼苗室培养5d后，逐步去掉薄膜，10 d后移到温室中，15d后统计存活率。
3 结果与分析
3.1 不同激素配比对洋桔梗叶盘不定芽诱导的影响
将大小约为5mm×5mm的洋桔梗叶盘接种到不定芽诱导培养基中，约10 d左右，多数处理叶盘的切口边沿出现淡黄绿色的愈伤组织，20 d左右，有绿色芽点出现，25d芽点长成不定芽，但也有叶盘切口形成的愈伤组织只是体积增大，并未产生芽点，或是没有形成愈伤组织。
通过实验表明，随着BA浓度的增加，不定芽的诱导数也随之增加，但当BA浓度为1mg/l时，植株出现严重玻璃化现象，故不定芽的诱导率也相对下降，且植株矮小，生长状态较差；随着NAA浓度的增加，不定芽的诱导数量也随之增加，但当NAA浓度超过0.05mg/l时，不定芽的诱导数量开始下降；当BA为0.5mg/l，NAA为0.05mg/l时，不定芽的诱导数量达到最大，每叶盘产生的平均不定芽数为17.25，且植株长势良好。
实验表明，BA，TDZ和2-ip对不定芽的诱导作用依次增强，而且随着细胞分裂素浓度的增加，除了2-ip外，每叶盘能产生的不定芽数也随之增多。当2-ip浓度为0.5mg/l时，每叶盘产生的不定芽数最多，为2.9。
3.2 不同生长素对植株生根的影响
通过实验表明，NAA和IBA都具有促进植物生根的作用，但NAA较IBA更利于愈伤组织的产生。在含有NAA的1/2MS培养基中，幼苗先在基部形成淡黄绿色的愈伤组织，后从愈伤组织上长出不定根，当NAA浓度为0.1mg/L时，根的诱导率为76%，平均根数为3.3条，平均根长为1.8cm，随着NAA浓度的增加，形成的愈伤组织就越多，从愈伤组织上产生的不定根也就越多，而且细小，根系也有玻璃化现象产生，不定根很容易随愈伤组织一起从茎基部脱落，故根的生长状况未统计。
在含有IBA的生根培养基中，根系主要是从茎基部产生，并且随着IBA浓度的增加，根的数量及根长度也先增加后降低。当IBA浓度为0.1mg/L时，根的诱导率为82%，平均根数为3.1条，平均根长为1.9cm；当IBA浓度为0.5mg/L时，根的诱导率为94%，平均根数为4.6条，平均根长为2.8cm；当IBA浓度为1.0 mg/L时，根的诱导率为88%，平均根数为3.6条，平均根长为2.2cm。因此，洋桔梗植株最佳生根培养基为1/2MS IBA0.5mg/l
综上所述，根据实验可知，我们对在含有不同激素配比的培养基中，洋桔梗叶盘不定芽的诱导分化进行了研究，结果发现，随着BA浓度的增加，不定芽的诱导数目也随之增加，但过高的BA浓度，如本试验中当BA浓度为1mg/l时，植株会出现严重的玻璃化现象，植株的生长状态也较差。随着NAA浓度的增加，不定芽的诱导数量也随之增加，但当NAA浓度超过0.05mg/l时，不定芽的诱导数量开始下降，这表明：BA/NAA的比例对不定芽的诱导至关重要，决定不定芽产生的数目和状态。其它研究认为，NAA是一种作用性极强的生长素，低浓度的NAA有利于根的形成，过高浓度更利于愈伤组织的诱导，本试验亦证明了这一结论。
在只含有细胞分裂素（BA，TDZ和2-ip）的培养基中，无论是愈伤组织量，还是不定芽诱导的数目，均少于在含有细胞分裂素和生长素两种激素的培养基中两者的数量，这表明：细胞分裂素和生长素两者的结合使用，对愈伤组织及不定芽的诱导具有重要作用；单独使用细胞分裂素，不利于愈伤组织和不定芽的诱导。此外，由于BA，TDZ和2-ip三种细胞分裂素的活性依次增强，其产生的不定芽的数量也随之增多。
（作者单位：1.113006辽宁省抚顺市农业技术推广中心；2.150040东北林业大学）
1 试验材料
供试材料为洋桔梗品种“丽莎” ，由辽宁省农业科学院花卉研究所提供。
2 试验方法
采集洋桔梗健康植株的叶片，将其置于烧杯中，按程序进行漂洗和消毒。将叶片横切成2～3段，整理成5mm×5mm大小的叶盘后，接种于不定芽诱导培养基中（表1、表2）。诱导基本培养基以MS为基本培养基，附加细胞分裂素（BA、TDZ、2-ip），生长素（NAA），蔗糖30 g/L，琼脂2.5g/L，培养基的pH值为5.8。每个处理组合接种叶盘30片，重复3次，培养条件为25℃，光照16h/d。40 d后统計诱导率，并观察记录幼苗的生长状况
将叶盘上诱导产生的长约1.5～2cm的不定芽接种到生根培养基中，生根培养基以1/2MS为基本培养基，附加不同生长素（见表3），40 d后统计生根率。
选取健壮的生根植株和玻璃化植株各30株，洗净根部琼脂，然后将其移栽到装有花卉专用营养土的钵中，覆盖透明薄膜，于幼苗室培养5d后，逐步去掉薄膜，10 d后移到温室中，15d后统计存活率。
3 结果与分析
3.1 不同激素配比对洋桔梗叶盘不定芽诱导的影响
将大小约为5mm×5mm的洋桔梗叶盘接种到不定芽诱导培养基中，约10 d左右，多数处理叶盘的切口边沿出现淡黄绿色的愈伤组织，20 d左右，有绿色芽点出现，25d芽点长成不定芽，但也有叶盘切口形成的愈伤组织只是体积增大，并未产生芽点，或是没有形成愈伤组织。
通过实验表明，随着BA浓度的增加，不定芽的诱导数也随之增加，但当BA浓度为1mg/l时，植株出现严重玻璃化现象，故不定芽的诱导率也相对下降，且植株矮小，生长状态较差；随着NAA浓度的增加，不定芽的诱导数量也随之增加，但当NAA浓度超过0.05mg/l时，不定芽的诱导数量开始下降；当BA为0.5mg/l，NAA为0.05mg/l时，不定芽的诱导数量达到最大，每叶盘产生的平均不定芽数为17.25，且植株长势良好。
实验表明，BA，TDZ和2-ip对不定芽的诱导作用依次增强，而且随着细胞分裂素浓度的增加，除了2-ip外，每叶盘能产生的不定芽数也随之增多。当2-ip浓度为0.5mg/l时，每叶盘产生的不定芽数最多，为2.9。
3.2 不同生长素对植株生根的影响
通过实验表明，NAA和IBA都具有促进植物生根的作用，但NAA较IBA更利于愈伤组织的产生。在含有NAA的1/2MS培养基中，幼苗先在基部形成淡黄绿色的愈伤组织，后从愈伤组织上长出不定根，当NAA浓度为0.1mg/L时，根的诱导率为76%，平均根数为3.3条，平均根长为1.8cm，随着NAA浓度的增加，形成的愈伤组织就越多，从愈伤组织上产生的不定根也就越多，而且细小，根系也有玻璃化现象产生，不定根很容易随愈伤组织一起从茎基部脱落，故根的生长状况未统计。
在含有IBA的生根培养基中，根系主要是从茎基部产生，并且随着IBA浓度的增加，根的数量及根长度也先增加后降低。当IBA浓度为0.1mg/L时，根的诱导率为82%，平均根数为3.1条，平均根长为1.9cm；当IBA浓度为0.5mg/L时，根的诱导率为94%，平均根数为4.6条，平均根长为2.8cm；当IBA浓度为1.0 mg/L时，根的诱导率为88%，平均根数为3.6条，平均根长为2.2cm。因此，洋桔梗植株最佳生根培养基为1/2MS IBA0.5mg/l
综上所述，根据实验可知，我们对在含有不同激素配比的培养基中，洋桔梗叶盘不定芽的诱导分化进行了研究，结果发现，随着BA浓度的增加，不定芽的诱导数目也随之增加，但过高的BA浓度，如本试验中当BA浓度为1mg/l时，植株会出现严重的玻璃化现象，植株的生长状态也较差。随着NAA浓度的增加，不定芽的诱导数量也随之增加，但当NAA浓度超过0.05mg/l时，不定芽的诱导数量开始下降，这表明：BA/NAA的比例对不定芽的诱导至关重要，决定不定芽产生的数目和状态。其它研究认为，NAA是一种作用性极强的生长素，低浓度的NAA有利于根的形成，过高浓度更利于愈伤组织的诱导，本试验亦证明了这一结论。
在只含有细胞分裂素（BA，TDZ和2-ip）的培养基中，无论是愈伤组织量，还是不定芽诱导的数目，均少于在含有细胞分裂素和生长素两种激素的培养基中两者的数量，这表明：细胞分裂素和生长素两者的结合使用，对愈伤组织及不定芽的诱导具有重要作用；单独使用细胞分裂素，不利于愈伤组织和不定芽的诱导。此外，由于BA，TDZ和2-ip三种细胞分裂素的活性依次增强，其产生的不定芽的数量也随之增多。
（作者单位：1.113006辽宁省抚顺市农业技术推广中心；2.150040东北林业大学）