ErbB3/Her3基因重组慢病毒的构建及应用

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目的:构建慢病毒Lenti-Her3,探索ErbB3/Her3在p44通路中的作用。方法:将ErbB3/Her3基因的两个片段Her3-1和Her3-2分段克隆至p CDH-CMV-MCS-EF1-Puro,构建慢病毒载体p CDH-Her3,然后将其包装成慢病毒Lenti-Her3;用Lenti-Her3感染经p44-shRNA沉默的A549细胞,细胞计数法检测细胞的生长情况,Western blot法检测P44、Her3蛋白的表达。结果:转染p44-shRNA的A549细胞P44蛋白不表达,Her3蛋白表达显著降低,细胞计数显著降低;Lenti-Her3感染后,p44沉默的A549细胞Her3蛋白表达显著增强,细胞计数有所升高(P<0.05),但未达到正常水平。结论:成功构建了重组慢病毒Lenti-Her3;p44可部分通过Her3促进肺癌A549细胞的生长,可能成为肺癌药物研究的新靶点。
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