【摘 要】
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目的:探讨芪参益气滴丸含药血清对缺氧/复氧H9C2心肌细胞KATP通道开放及PI3K/AKT信号通路的影响.方法:体外培养H9C2心肌细胞随机分为5组,即A:H9C2细胞组,B:H9C2细胞+H2O2模型组,C:H9C2细胞+H2O2模型+芪参益气组,D:H9C2细胞+H2O2模型+芪参益气+PI3K/AKT信号通路阻断剂(wort)组,E:H9C2细胞+H2O2模型+芪参益气+mitoKATP特异性阻断剂(5-HD)组,按照相应的条件进行给药干预.CCK-8法检测各组心肌细胞活性;Western blo
【机 构】
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广西中医药大学第一附属医院,广西 南宁530022;广西中医药大学,广西 南宁530299
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目的:探讨芪参益气滴丸含药血清对缺氧/复氧H9C2心肌细胞KATP通道开放及PI3K/AKT信号通路的影响.方法:体外培养H9C2心肌细胞随机分为5组,即A:H9C2细胞组,B:H9C2细胞+H2O2模型组,C:H9C2细胞+H2O2模型+芪参益气组,D:H9C2细胞+H2O2模型+芪参益气+PI3K/AKT信号通路阻断剂(wort)组,E:H9C2细胞+H2O2模型+芪参益气+mitoKATP特异性阻断剂(5-HD)组,按照相应的条件进行给药干预.CCK-8法检测各组心肌细胞活性;Western blot法检测各组心肌细胞AKT、p-AKT蛋白的表达.标准膜片钳全细胞记录方法记录电流,由Pclamp6.0软件采集和分析电流.结果:CCK-8检测结果显示:与A组相比,B组心肌细胞活性明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01);与B组心肌细胞相比,C组差异具有统计学意义(P<0.01);与C组相比,D、E组心肌细胞活性明显降低(P<0.05);Western blot结果显示:与A组相比,B、C、D、E组p-AKT蛋白表达显著降低,组间差异具有统计学意义(P<0.01);与B组相比,C、D、E组p-AKT蛋白表达显著升高,组间差异具有统计学意义(P0.05).全细胞膜片钳实验结果显示:与A组相比,B组外向电流显著增加,组间差异具有统计学意义(P<0.01);与B组相比,C组的心肌细胞进一步增加外向电流,组间差异具有统计学意义(P<0.01);与C组相比,D、E组电流明显降低,组间具有统计学意义(P<0.01).结论:芪参益气滴丸通过激活缺氧/复氧H9C2心肌细胞中p-AKT蛋白的表达及KATP通道的开放,对心肌细胞起到保护作用.
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