【摘 要】
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目的 对红球菌g26中的短链脱氢酶基因进行克隆表达并考察其能否将甾体化合物雄甾-4-烯-3.17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD)C17位羰基还原为羟基.方法 通过检索数据库获
【机 构】
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沈阳药科大学生命科学与生物制药学院,辽宁沈阳110016
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目的 对红球菌g26中的短链脱氢酶基因进行克隆表达并考察其能否将甾体化合物雄甾-4-烯-3.17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD)C17位羰基还原为羟基.方法 通过检索数据库获得红球菌g26中的两个短链脱氢酶基因,应用PCR、重组表达载体的构建等生物技术在大肠杆菌中进行外源表达,破碎细胞后应用SDS-PAGE对可溶性蛋白进行分析,筛选出合适的目的蛋白诱导条件,进而进行酶的体外转化反应,应用薄层色谱分析、高效液相分析和质谱法鉴定产物结构.结果 与结论红球菌g26中的短链脱氢酶可以转化甾体化合物AD为睾丸酮(TS).红球菌g26内的短链脱氢酶参与了甾体化合物C17位羰基到羟基的还原反应.
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