【摘 要】
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该研究探索了辛酸钠对骨骼肌细胞缺糖缺氧/再灌注(OGD/Rep)损伤的保护作用.利用锥虫蓝染色法测定6种不同浓度的辛酸钠培养液对正常培养骨骼肌细胞24h存活率的影响.随后采用缺糖缺氧后复糖复氧的方法构建骨骼肌细胞OGD/Rep损伤模型,将细胞随机分为对照组、OGD/Rep组、0.25 mmol/L辛酸钠组和0.50 mmol/L辛酸钠组.CCK8法测定各组细胞活性,检测各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物(·O2-)以及超氧化物歧化酶(SOD)水平;JC-1荧光探针测定各组细胞线粒体膜电位水平;TUN
【机 构】
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浙江大学医学院附属第二医院急诊医学科,浙江省急危重症临床医学研究中心,浙江省严重创伤与烧伤诊治重点实验室,杭州310009
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该研究探索了辛酸钠对骨骼肌细胞缺糖缺氧/再灌注(OGD/Rep)损伤的保护作用.利用锥虫蓝染色法测定6种不同浓度的辛酸钠培养液对正常培养骨骼肌细胞24h存活率的影响.随后采用缺糖缺氧后复糖复氧的方法构建骨骼肌细胞OGD/Rep损伤模型,将细胞随机分为对照组、OGD/Rep组、0.25 mmol/L辛酸钠组和0.50 mmol/L辛酸钠组.CCK8法测定各组细胞活性,检测各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物(·O2-)以及超氧化物歧化酶(SOD)水平;JC-1荧光探针测定各组细胞线粒体膜电位水平;TUNEL染色法检测各组细胞凋亡数目,Western blot测定各组细胞Bax、Bcl-2、Mfn-2、Drp-1蛋白表达水平.结果表明,6种浓度辛酸钠处理组中,0.25 mmol/L辛酸钠组、0.50 mmol/L辛酸钠组与对照组细胞存活率差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组相比,OGD/Rep组细胞活性降低,细胞LDH水平升高,细胞中·O2-产生量增加,SOD活性降低,线粒体膜电位降低以及细胞凋亡数目增多(P＜0.05).与OGD/Rep组相比,0.25 mmol/L辛酸钠组、0.50 mmol/L辛酸钠组细胞活性均增强,细胞LDH水平下降(P＜0.05);0.25 mmol/L辛酸钠组·O2-水平有下降趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05);0.25 mmol/L辛酸钠组SOD活性增强(P＜0.05).0.25 mmol/L和0.50 mmol/L辛酸钠组与OGD/Rep组相比线粒体膜电位增加,细胞凋亡数目减少.与对照组相比,OGD/Rep组Bcl-2/Bax蛋白值降低,Drp-1和Mfn-2蛋白表达量降低;而与OGD/Rep组相比,0.25 mmol/L、0.50 mmol/L辛酸钠组Bcl-2/Bax蛋白值升高,Drp-1和Mfn-2蛋白表达量增加.研究表明,早期应用辛酸钠可减轻OGD/Rep引起的骨骼肌细胞损伤,抑制细胞的过氧化状态并减少细胞凋亡,其机制可能与辛酸钠调节线粒体结构动态平衡相关.
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