新疆出血热病毒S基因在真核系统的克隆和表达

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tongjingjj

【摘要】

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【作者】

：

唐青于凤刚赵秀芹陶晓霞 Anna Papa A Antoniadis 杭长寿

【机构】

：

中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所,希腊亚里士多德大学医学院,中国预防医学科学院病毒所

【出处】

：

中华微生物学和免疫学杂志

【发表日期】

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2002年22期

【关键词】

：

新疆出血热病毒基因克隆 S基因杆状病毒表达蛋白单克隆抗体蛋白带凝胶纯化试剂盒蛋白条带转染

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目的在真核系统表达XHFV S基因片段,制备安全、特异、便于操作的S蛋白. 方法设计引物,扩增得到S基因编码片段,用杆状病毒表达载体pFastBac HT b克隆S基因,并在昆虫细胞中表达S基因. 结果地高辛探针杂交和PCR扩增结果表明成功地构建了含XHFV S基因片段的pBac-Sxhf质粒.SDS-PAGE分析表达产物在相对分子质量(Mr)为66×103下方出现1条明显的蛋白条带,Western blot发现该蛋白带可以与抗XHF病毒核蛋白单克隆抗体发生反应. 结论构建的含XHFV S基因的重组杆状病毒可以在昆虫细胞表达S蛋白,该蛋白可与特异性抗体相结合.

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