肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因对肝癌细胞杀伤作用及旁观者效应研究

来源 :中华消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hzp901124
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目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因在诱导肝癌细胞凋亡时是否存在旁观者效应,以及旁观者效应的可能机制.方法构建表达TRAIL基因的双腺病毒载体系统Ad/GT-TRAIL+Ad/PGK-GVl6,通过293包装细胞产生的病毒上清液将TRAIL基因转入肝癌细胞SMMC7721细胞中,RT-PCR检测TRAIL基因的表达,以MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率;不同比例混合培养SMMC7721/TRAIL和SMMC7721细胞,检测混合细胞生长抑制率来评价TRAIL基因的旁观者效应,并以滤去细胞成分的转染细胞培养液培养未转染细胞,观测可溶性因子在TRAIl基因旁观者效应中的作用.结果TRAIL基因对SMMC7721细胞的生长抑制率与PBS、LacZ基因和Bax基因比较,差异有显著性(P<0 05);SMMC7721细胞的凋亡率,TRAIL基因与PBS、LacZ基因和Bax基因比较,差异有显著性(P<0.05);混合细胞的生长抑制率,以SMMC7721/TRAIL占0%时为0,占5%时为15.9%,占25%时为67.0%,占50%时为80.2%,占100%时为87.7%;以PBS对SMMC772l的生长抑制率为0,则滤去细胞成分的转染细胞培养液对SMMC7721的生长抑制率为4%,两者差异无显著性.结论双腺病毒载体系统介导的TRAIL基因对肝癌细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用,并存在旁观者效应,可溶性因子在TRAIL的旁观者效应中不起作用。

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