大鼠AQP7基因重组腺病毒载体的构建及其在3T3-L1脂肪细胞中的表达

来源 :温州医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuw_ei
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目的:构建携带大鼠AQP7基因的腺病毒载体,并检测其在3T3-L1脂肪细胞中的表达。方法:采用RT-PCR方法,从大鼠脂肪组织中扩增克隆大鼠AQP7基因,插入到穿梭质粒中获得重组质粒pDC316-AQP7。PCR、酶切鉴定后,重组穿梭质粒和骨架质粒经脂质体2000转染293细胞出毒产生重组腺病毒。经PCR进行鉴定,转染293细胞扩增并纯化,半数组织培养感染剂量(TCID50)方法测定腺病毒滴度。体外转染分化成熟的3T3-L1细胞,用Westernblot方法检测AQP7的表达水平。结果:PCR、酶切及测序
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