巴东木莲DNA的提取及SRAP-PCR反应体系的正交优化止父优化

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研究确定了提取巴东木莲基因组DNA的方法.采用正交试验设计法对影响SRAP—PCR反应的引物浓度、TaqDNA聚合酶的用量、Mg^2+和dNTPs浓度及PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了比较、优化,同时对DNA模板浓度进行了筛选。结果表明,Mg^2+、dNTPs、砌酶及引物的不同水平均对PCR反应结果有显著的影响。建立了巴东木莲20μL SRAP—PCR的反应体系为1xbuffer、Mg^2+浓度为2.0mmol·L^-1、dNTPs浓度为0.25mmol·L^-1、引物浓度为
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