【摘 要】
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目的 获得WU多瘤病毒重组衣壳蛋白,分析其抗原性,筛选具有诊断价值的抗原.方法 采用PCR技术扩增WU多瘤病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的基因片段,并将目的基因插入PGEX-20T表达载
【机 构】
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广东医学院附属深圳福田医院检验医学部,汕头医学院附属第二临床医学院儿科
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目的 获得WU多瘤病毒重组衣壳蛋白,分析其抗原性,筛选具有诊断价值的抗原.方法 采用PCR技术扩增WU多瘤病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的基因片段,并将目的基因插入PGEX-20T表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导表达.用免疫印迹法对表达蛋白进行鉴定和分析并用临床样本进行初步验证.结果 重组质粒在BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导、SDS-PAGE和免疫印迹鉴定显示在相对分子质量(Mr) 69×103、63×103和56×103处出现清晰条带,重组质粒经双酶切鉴定,表达产物经GST标签鉴定均正确.16份呼吸道分泌物WU多瘤病毒核酸阳性血清标本和70份阴性标本免疫印迹分析表明,重组蛋白具有良好的抗原性.结论 成功构建了WU多瘤病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的表达载体,表达的重组蛋白具有良好的抗原性,为进一步研究提供了资料.
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