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摘要：目的：探讨革兰阴性菌引起的血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏的应用方法与结果。
方法：选取我院自2011年9月～2013年9月期间血培养阳性标本100份，所有标本均为该期间内分离的非重复性标本。基于VITEK方法对血培养阳性标本进行直接细菌鉴定。同时以API检出结果为金标准，对VITEK直接细菌鉴定于药敏应用结果的符合率情况进行观察分析。
结果：VITEK直接细菌鉴定方法下细菌鉴定总符合率为98.00%，药敏鉴定结果总符合率为98.37%，与API金标准方法检出结果对比无明显差异，P>0.05，不具有统计学意义。
结论：基于VITEK方法对血培养阳性标本进行直接细菌鉴定与药敏分析检出结果可靠，操作简便，可为临床及时修正用药提供依据，具有应用价值，值得推广。
关键词：革兰阴性菌 血培养阳性标本 直接细菌鉴定 药敏
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2014.06.035
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2014）06-0029-01
为进一步分析革兰阴性菌引起的血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏的应用方法与结果，本文对我院所收集100份血培养阳性标本展开详细分析，现报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料。选取我院自2011年9月～2013年9月期间血培养阳性标本100份，所有标本均为该期间内分离的非重复性标本。选取大肠埃希菌标准菌株为ATCC 25922菌株，铜绿假单胞菌标准菌株为ATCC 27853菌株（提供方为卫生部临床检验中心）。
1.2 方法。
1.2.1 仪器与试剂。血培养阳性标本分析过程中所涉及仪器与试剂包括：①血培养仪；②抗生素中和需氧血培养瓶；③真空血清分离管；④全自动微生物分析仪；⑤血平板；⑥药敏纸片。
1.2.2 检测方法。基于VITEK方法对血培养阳性标本进行直接细菌鉴定。具体操作方法为：使用无菌注射器抽取阳性瓶内血培养标本，抽取剂量为8.0mL，注入BD（8.0mL）真空血清分离管。离心条件控制为3000.0r/min，持续离心处理10.0min，剔除上层血清样本，使用无菌吸管对灰白色细菌层进行吸取处理，放置于无菌容器中，加入适当无菌生理盐水，充分混合。用于稀释可溶性血红蛋白试剂同样给予离心处理（3000.0r/min，离心处理持续10.0min），剔除上层血清备用。调制革兰阴性杆菌1.0McF，抽取50.0uL剂量菌液，与浓度为0.45%生理盐水1.8mL充分混合，靜置24.0h后直接鉴定细菌构成，同步获取药敏试验结果。同时，抽取次代培养纯菌落，参照API方法进行细菌鉴定与药敏试验。
1.3 统计学处理。本文数据使用SPSS17.0软件进行分析与计算，计数资料以%表示，以X2检验，可信区间95%，检验水准为0.05，当P<0.05时为差异显著，且具有统计学意义。
2 结果
2.1 革兰氏阴性菌引起血培养阳性标本直接细菌鉴定结果分析。VITEK直接细菌鉴定方法下细菌鉴定总符合率为98.00%（98/100），与API金标准方法检出结果对比无明显差异，P>0.05，不具有统计学意义。详细数据见表1。
3 讨论
有关研究数据显示：药敏试验要取得快速结果，最主要方法在于：以临床标本自身作为接种物对象[1，2]，虽其结果与常规纯菌法检测结果无法完全符合，但同样能够对细菌药敏的基本情况加以反应。该方法与临床客观需求充分适应，具有推广价值。本次研究中，以API检测结果为金标准，分析得知：VITEK直接细菌鉴定方法下细菌鉴定、药敏鉴定结果与API金标准方法检出结果对比无明显差异，P>0.05，不具有统计学意义。该数据证实：在临床各类常见细菌及药敏对象中，VITEK直接鉴定方法都具有极高的可信度。结合表1中的数据可知：在对木糖氧化产碱杆菌以及睾丸酮丛毛单胞菌进行检验的过程当中，造成细菌鉴定出现误差的主要原因为：由于以上两种细菌自身生长速度相对比较缓慢，需要在持续次代培养2.0d以后，方可形成直观菌落组织。从这一角度上来说，对于以上类型生长缓慢细菌菌种而言，VITEK直接鉴定方法存在一定误差，值得重视。同时，在药敏分析的过程当中，VITEK直接鉴定符合率较高，其机制在于：直接鉴定分析仪可支持参照细菌天然耐药性表现，检测耐药机制[3]，从而对药敏结果进行修正，原则上可有效避免产生误差问题。
综上所述：基于VITEK方法对血培养阳性标本进行直接细菌鉴定与药敏分析检出结果可靠，操作简便，可为临床及时修正用药提供依据，具有应用价值，值得进一步推广。
参考文献
[1] 陈素梅.血培养阳性标本的病原菌分布及耐药性分析[J].中国抗生素杂志，2013，38（8）：6-8
[2] 林晓晖，梁卫芳，严智敏等.275例血培养阳性标本的病原菌构成及耐药性分析[J].中国抗生素杂志，2011，36（12）：943-947
[3] 毛惠娜，陈国军，董长林等.菌血症血培养阳性标本直接药敏实验与常规药敏法比较[J].武警医学，2011，22（2）：180-181
方法：选取我院自2011年9月～2013年9月期间血培养阳性标本100份，所有标本均为该期间内分离的非重复性标本。基于VITEK方法对血培养阳性标本进行直接细菌鉴定。同时以API检出结果为金标准，对VITEK直接细菌鉴定于药敏应用结果的符合率情况进行观察分析。
结果：VITEK直接细菌鉴定方法下细菌鉴定总符合率为98.00%，药敏鉴定结果总符合率为98.37%，与API金标准方法检出结果对比无明显差异，P>0.05，不具有统计学意义。
结论：基于VITEK方法对血培养阳性标本进行直接细菌鉴定与药敏分析检出结果可靠，操作简便，可为临床及时修正用药提供依据，具有应用价值，值得推广。
关键词：革兰阴性菌 血培养阳性标本 直接细菌鉴定 药敏
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2014.06.035
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2014）06-0029-01
为进一步分析革兰阴性菌引起的血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏的应用方法与结果，本文对我院所收集100份血培养阳性标本展开详细分析，现报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料。选取我院自2011年9月～2013年9月期间血培养阳性标本100份，所有标本均为该期间内分离的非重复性标本。选取大肠埃希菌标准菌株为ATCC 25922菌株，铜绿假单胞菌标准菌株为ATCC 27853菌株（提供方为卫生部临床检验中心）。
1.2 方法。
1.2.1 仪器与试剂。血培养阳性标本分析过程中所涉及仪器与试剂包括：①血培养仪；②抗生素中和需氧血培养瓶；③真空血清分离管；④全自动微生物分析仪；⑤血平板；⑥药敏纸片。
1.2.2 检测方法。基于VITEK方法对血培养阳性标本进行直接细菌鉴定。具体操作方法为：使用无菌注射器抽取阳性瓶内血培养标本，抽取剂量为8.0mL，注入BD（8.0mL）真空血清分离管。离心条件控制为3000.0r/min，持续离心处理10.0min，剔除上层血清样本，使用无菌吸管对灰白色细菌层进行吸取处理，放置于无菌容器中，加入适当无菌生理盐水，充分混合。用于稀释可溶性血红蛋白试剂同样给予离心处理（3000.0r/min，离心处理持续10.0min），剔除上层血清备用。调制革兰阴性杆菌1.0McF，抽取50.0uL剂量菌液，与浓度为0.45%生理盐水1.8mL充分混合，靜置24.0h后直接鉴定细菌构成，同步获取药敏试验结果。同时，抽取次代培养纯菌落，参照API方法进行细菌鉴定与药敏试验。
1.3 统计学处理。本文数据使用SPSS17.0软件进行分析与计算，计数资料以%表示，以X2检验，可信区间95%，检验水准为0.05，当P<0.05时为差异显著，且具有统计学意义。
2 结果
2.1 革兰氏阴性菌引起血培养阳性标本直接细菌鉴定结果分析。VITEK直接细菌鉴定方法下细菌鉴定总符合率为98.00%（98/100），与API金标准方法检出结果对比无明显差异，P>0.05，不具有统计学意义。详细数据见表1。
3 讨论
有关研究数据显示：药敏试验要取得快速结果，最主要方法在于：以临床标本自身作为接种物对象[1，2]，虽其结果与常规纯菌法检测结果无法完全符合，但同样能够对细菌药敏的基本情况加以反应。该方法与临床客观需求充分适应，具有推广价值。本次研究中，以API检测结果为金标准，分析得知：VITEK直接细菌鉴定方法下细菌鉴定、药敏鉴定结果与API金标准方法检出结果对比无明显差异，P>0.05，不具有统计学意义。该数据证实：在临床各类常见细菌及药敏对象中，VITEK直接鉴定方法都具有极高的可信度。结合表1中的数据可知：在对木糖氧化产碱杆菌以及睾丸酮丛毛单胞菌进行检验的过程当中，造成细菌鉴定出现误差的主要原因为：由于以上两种细菌自身生长速度相对比较缓慢，需要在持续次代培养2.0d以后，方可形成直观菌落组织。从这一角度上来说，对于以上类型生长缓慢细菌菌种而言，VITEK直接鉴定方法存在一定误差，值得重视。同时，在药敏分析的过程当中，VITEK直接鉴定符合率较高，其机制在于：直接鉴定分析仪可支持参照细菌天然耐药性表现，检测耐药机制[3]，从而对药敏结果进行修正，原则上可有效避免产生误差问题。
综上所述：基于VITEK方法对血培养阳性标本进行直接细菌鉴定与药敏分析检出结果可靠，操作简便，可为临床及时修正用药提供依据，具有应用价值，值得进一步推广。
参考文献
[1] 陈素梅.血培养阳性标本的病原菌分布及耐药性分析[J].中国抗生素杂志，2013，38（8）：6-8
[2] 林晓晖，梁卫芳，严智敏等.275例血培养阳性标本的病原菌构成及耐药性分析[J].中国抗生素杂志，2011，36（12）：943-947
[3] 毛惠娜，陈国军，董长林等.菌血症血培养阳性标本直接药敏实验与常规药敏法比较[J].武警医学，2011，22（2）：180-181