【摘 要】
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精氨酸酶催化精氨酸水解生成鸟氨酸和尿素,是哺乳动物尿素循环的关键步骤之一,在机体代谢方面起着重要的作用。在分类上精氨酸属于半必需氨基酸,但在快速增长的组织,特别是肿
【基金项目】
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国家自然科学基金(31470764)
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精氨酸酶催化精氨酸水解生成鸟氨酸和尿素,是哺乳动物尿素循环的关键步骤之一,在机体代谢方面起着重要的作用。在分类上精氨酸属于半必需氨基酸,但在快速增长的组织,特别是肿瘤组织里却属于必需氨基酸。精氨酸酶可以通过分解精氨酸对肿瘤细胞进行营养剥夺,进而起到抑制肿瘤细胞生长的作用,与此同时却较少影响正常组织代谢,因此可能具有良好的应用前景。精氨酸酶包括精氨酸酶1和精氨酸酶2两种,精氨酸酶1主要表达于肝脏,参与肝脏尿素循环。本研究在获得人精氨酸酶1全长c DNA的基础上,将其克隆至原核高表达载体,通过自动诱导系统进行了人肝脏精氨酸酶1重组蛋白(His10-arginase1)的表达。通过Ni-NTA亲和层析和Mono Q阴离子交换层析纯化,重组人精氨酸酶1的产量为每升菌液48.5 mg,其纯度超过95%。通过酶活检测,重组人精氨酸酶1活性可达到128 U/mg。与已报道的精氨酸酶相比较,我们得到的重组人精氨酸酶1具有与之相当的酶活性。本研究为将来进一步深入了解精氨酸酶的生化功能及与相关疾病的关系奠定了基础。
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