【摘 要】
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目的：建立小麦球蛋白的ELISA检测技术,用于蛋白质掺假以及过敏原成分的快速检测。方法从麦胚粉中提取球蛋白,抗原免疫 Balb/c小鼠进行4次免疫后,通过脾脏细胞杂交瘤技术及间接
【机 构】
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浙江大学生物系统工程与食品科学学院，杭州 310058 杭州市质量技术监督检测院，杭州 310019;杭州市食品药品检验研究院,杭州,310022;杭州市质量技术监督检测院,杭州,310019;
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目的：建立小麦球蛋白的ELISA检测技术,用于蛋白质掺假以及过敏原成分的快速检测。方法从麦胚粉中提取球蛋白,抗原免疫 Balb/c小鼠进行4次免疫后,通过脾脏细胞杂交瘤技术及间接 ELISA筛选制备单克隆抗体,同时制备兔抗小麦球蛋白的多克隆抗体。通过棋盘滴定法,初步确定单克隆抗体和多克隆抗体的最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA。结果通过免疫和杂交瘤技术获得了抗小麦球蛋白的单克隆抗体,纯化后抗体的效价均达到1：107,通过免疫兔制备的多克隆抗体经纯化后效价在1：2.4×105左右,所建立的双抗体夹心ELISA方法最低检测限为10 ng/mL,与其他物种的蛋白不发生交叉反应。结论本文建立的双抗体夹心ELISA方法具有良好的特异性和灵敏度,为建立乳品中小麦成分掺假及过敏原成分快速检测提供理论依据。
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