【摘 要】
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[目的]为检测鸭感染H6N6亚型AIV后排毒及在组织器官病毒分布情况。[方法]通过建立H6N6亚型AIV荧光定量PCR检测方法，以H6N6亚型AIV M基因保守序列设计特异性引物，将分离到的H6N6亚型AIV病毒反转录为cDNA,进行pMD18-T-M基因克隆质粒构建，以其为标准品建立荧光定量PCR标准曲线，并进行敏感性和重复性试验，利用所建立的方法检测鸭感染H6N6亚型AIV后排毒及在组织器官病
【基金项目】
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贵州省科技计划项目（黔科合支撑[2020]1Y043号）；
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[目的]为检测鸭感染H6N6亚型AIV后排毒及在组织器官病毒分布情况。[方法]通过建立H6N6亚型AIV荧光定量PCR检测方法，以H6N6亚型AIV M基因保守序列设计特异性引物，将分离到的H6N6亚型AIV病毒反转录为cDNA,进行pMD18-T-M基因克隆质粒构建，以其为标准品建立荧光定量PCR标准曲线，并进行敏感性和重复性试验，利用所建立的方法检测鸭感染H6N6亚型AIV后排毒及在组织器官病毒分布情况。[结果]该方法灵敏度高，最低检测到1.0×10~1 copies/μL,从而可以得出拷贝数与Ct值之间的线性关系曲线表达式：Ct=-3.408×lg Copynumber+33.773（R~2=0.998）,线性范围为1.0×10~7～1.0×10~1拷贝/μL,熔解峰的熔解温度在83℃左右。[结论]表明建立的鸭源H6N6亚型AIV荧光定量PCR检测方法，特异性强，重复性好，为后续实验研究提供了技术和数据支撑。
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