【摘 要】
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目的 建立基于微量细胞中和试验（MRNT）的血清抗新型冠状病毒（SARS-CoV-2）中和抗体的检测方法,并应用于检测新型冠状病毒肺炎（COVID-19）病例的血清抗SARS-CoV-2中和抗体水平。方法 用Vero细胞和已知滴度的SARS-CoV-2毒株对待测血清进行基于MRNT的中和抗体检测,对中和反应作用时间、Vero细胞代次等影响试验的关键因素进行验证,并用建立的方法重复4次检测8份血清样
【机 构】
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河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所
【基金项目】
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河南省科技厅重大专项（211100311000）； 新型冠状病毒防控应急攻关首批项目（201100310800）； 河南省中青年卫生健康科技创新领军人才培养项目（YXKC2020006）；
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目的 建立基于微量细胞中和试验（MRNT）的血清抗新型冠状病毒（SARS-CoV-2）中和抗体的检测方法,并应用于检测新型冠状病毒肺炎（COVID-19）病例的血清抗SARS-CoV-2中和抗体水平。方法 用Vero细胞和已知滴度的SARS-CoV-2毒株对待测血清进行基于MRNT的中和抗体检测,对中和反应作用时间、Vero细胞代次等影响试验的关键因素进行验证,并用建立的方法重复4次检测8份血清样品的中和抗体效价,计算变异系数（CV）,验证方法的重复性;用建立的方法检测165份COVID-19病例血清样本的中和抗体水平并进行分析;采用磁微粒化学发光免疫分析法（CMIA）检测其中55份感染3～4周的血清样本,并与建立方法的结果比对,分析两者的分布情况及相关性。结果不同中和反应作用时间（1.0 h、1.5 h、2.0 h）及不同代次（5代、10代、15代）Vero细胞测得血清样本的中和抗体效价相同;8份血清样本重复检测4次结果的CV为0.0%～14.2%,差异无统计学意义（F=0.508,P=0.680）,表明重复性良好;建立的方法测得165份血清阳性率98.18%,中和抗体效价分布范围为4～2 048,中位数（M）为128,几何平均效价（GMT）为93.80;对55份感染3～4周的样本,CMIA方法与建立方法检测阳性率均为100.00%,中和抗体分布范围为36.35～2 986.49 AU/mL,M为448.11 AU/mL,GMT为476.94 AU/mL。两种方法检测的中和抗体结果呈明显相关性,相关系数r=0.758。结论 成功建立了血清抗SARS-CoV-2中和抗体的检测方法,该方法具有良好的重复性,可用于评价血清抗SARS-CoV-2中和抗体水平及接种疫苗后的免疫效果。
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