【摘 要】
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目的 探究异甘草素（ISL）在体内外抑制喉癌细胞生长的作用机制。方法 采用MTT法检测人喉癌细胞系Hep-2和TU212用不同浓度的异甘草素（0,20,40,80,160μmol/L）培养24 h以及20μmol/L的异甘草素培养12,24,48 h的细胞存活率。将喉癌细胞分为对照组（未处理）和ISL 20μmol/L组（20μmol/L异甘草素处理24 h）,通过Hoechst 33258染色观
【基金项目】
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陕西省重点研发项目（2017ZDXM-SF-006）；
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目的 探究异甘草素（ISL）在体内外抑制喉癌细胞生长的作用机制。方法 采用MTT法检测人喉癌细胞系Hep-2和TU212用不同浓度的异甘草素（0,20,40,80,160μmol/L）培养24 h以及20μmol/L的异甘草素培养12,24,48 h的细胞存活率。将喉癌细胞分为对照组（未处理）和ISL 20μmol/L组（20μmol/L异甘草素处理24 h）,通过Hoechst 33258染色观察细胞形态。通过细胞划痕实验检测细胞迁移,通过Transwell实验检测细胞侵袭,通过流式细胞仪检测细胞凋亡。Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、信号转导和转录激活因子3（STAT3）和p53的蛋白表达水平。将接种Hep-2细胞的裸鼠随机分为2组:对照组（注射0.2 ml DMEM培养基）和异甘草素组（注射0.2 ml含有25 mg/kg异甘草素的DMEM培养基）,每组5只裸鼠,均连续给药7 d,末次给药21 d后测量肿瘤体积。结果 与0μmol/L异甘草素相比,当异甘草素浓度≥20μmol/L时,Hep-2和TU212细胞存活率均显著降低（P＜0.05）。与培养0 h相比,当培养24 h和48 h时,Hep-2和TU212细胞存活率均显著降低（P＜0.05）。ISL 20μmol/L组细胞出现染色质固缩和明亮的凋亡小体。与对照组相比,ISL 20μmol/L组Hep-2和TU212细胞的伤口愈合面积、侵袭细胞数均降低,细胞凋亡率均升高（P＜0.001）。与对照组相比,ISL 20μmol/L组Hep-2和TU212细胞中Bcl-2和p-STAT3蛋白表达水平均降低,Bax、cleaved Caspase-3和p53的蛋白表达水平均升高（P＜0.01）。末次给药21 d后,与对照组相比,异甘草素组裸鼠的肿瘤体积显著降低（P＜0.01）。结论 异甘草素通过激活线粒体凋亡途径并抑制STAT3信号通路来诱导喉癌细胞凋亡。
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