二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌过程中脾脏巨噬细胞的变化

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目的 观察在二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌过程中大鼠脾脏巨噬细胞(Mω)结构与功能的变化.方法 将SD大鼠50只随机分为正常对照组10只和实验组40只.实验组按DEN腹腔注射加慢性间断自由饮用DEN水溶液的方法制备肝癌肺转移模型,分别在造模的第8、13、16周随机处死大鼠.根据病理结果依次归为为肝硬化组(10只)、肝癌未转移组(10只)、肝癌转移组(10只).应用透射电镜观察各组大鼠脾脏Mω超微结构.贴壁法分离纯化Mω,应用Vybant吞噬检测试剂盒、噻唑蓝(MTY)比色法、Rat肿瘤坏死因子(TNF)-α Elispot试剂盒、DQTM ovalbumin试剂盒检测脾脏巨噬细胞活力和吞噬、代谢、分泌及抗原旱递功能.结果 Mω超微结构:肝硬化组和肝癌未转移组Mω较正常组Mω表面突起增多,细胞器增多;肝癌转移组Mω表面突起减少,细胞器较少.Mω吞噬指数:与正常对照组(75.6±1.7)比较,肝硬化组(84.7±1.9)升高(P<0.05);肝癌未转移组(89.5±3.1)显著升高(P<0.01);肝癌转移组(36.0±2.6)显著降低(P<0.01).Mω代谢率:与正常对照组(1.48±0.17)比较,肝硬化组和肝癌未转移组代谢率(1.53±0.15、1.56±0.14)增高(P<0.05),肝癌转移组(1.12±0.29)代谢率降低(P<0.05).TNF-α分泌值与正常对照组(626.6±24.6)比较,肝硬化组和肝癌末转移组(分别为741.0 4±52.9、1126.2±174.5)升高(P<0.05),肝癌未转移组增高更为显著(P<0.01),肝癌转移组(313.8±50.8)显著降低(P<0.01).抗原呈递阳性细胞比率(%):与正常组(16.45±1.86)比较,肝硬化组和肝癌未转移组(分别为24.03±1.87、27.95±2.63)显著升高(P<0.01);肝癌转移组(10.46±2.16)显著降低(P<0.01).结论 在肝硬化及肝癌早期,脾脏Mω吞噬、代谢、分泌、抗原呈递功能普遍增强;在肝癌晚期,脾脏Mω吞噬、代谢、分泌、抗原呈递功能普遍减弱.说明脾脏抗肿瘤作用呈双向性和时相性。

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