【摘 要】
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目的利用Tn917转座子构建金黄色葡萄球菌(简称"金葡菌")转座突变文库,从构建好的文库中筛选到持留性突变菌株。方法将含有Tn917的pID408质粒电转化入金葡菌Newman株,利用高温
【机 构】
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第三军医大学基础医学部微生物教研室,重庆市微生物工程实验室,
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目的利用Tn917转座子构建金黄色葡萄球菌(简称"金葡菌")转座突变文库,从构建好的文库中筛选到持留性突变菌株。方法将含有Tn917的pID408质粒电转化入金葡菌Newman株,利用高温及红霉素诱导使其发生转座作用,建立转座子文库并对其进行质量评价;通过对稳定期24 h及36 h菌液予以100 MIC达托霉素处理,之后计数活菌数目的方法,比较文库中筛选到的特定菌株T18、T18s与野生株的持留性差异。结果建立了金葡菌Newman株转座子文库,从中随机挑取19个文库子,进行转座子插入位点测定,证实其插入随机性良好。在培养24 h和36 h两个时相点,野生株、T18及T18s株之间持留性存在不同程度的差异。结论成功构建了插入随机性良好、可用于多种研究的金葡菌转座子文库,并从中得到持留性变化菌株,且不同生长时间点各株细菌之间表现出持留性差异。
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