绵羊ARQ基因型PrP前体蛋白基因的克隆及原核表达

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangtao7897
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目的构建ARQ基因型PrP前体蛋白基因原核表达重组质粒,为TSE的检测及诊断、PrP的结构与功能研究奠定基础。方法根据OenBank中绵羊PrP基因全序列和表达载体pET28a载体的多克隆位点设计了绵羊PrP前体蛋白基因引物,以绵羊基因组DNA为模板,PCR扩增绵羊PrP前体蛋白基因,通过酶切将些基因克隆到pET28a(+)载体中,构建了重组原核表达质粒pET—OPrP。重组质粒转化E.coli BL-21感受态细胞,用IPTG诱导表达,通过PAGE电泳和Western-bloting鉴定表达的重组蛋白。
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