【摘 要】
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目的分离纯化α1抗胰蛋白酶（alpha 1-antitrypsin,AAT）,并评价其对C-BSA型大鼠肾炎模型的影响。方法以Cohn组分Ⅳ（Cohn frcationⅣ,FⅣ）为原料,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和S-200凝胶过滤柱层析纯化AAT,底物显色法检测其生物学活性。建立阳离子化小牛血清蛋白型大鼠肾炎模型,分别注射5.75和11.5 mg/kg的AAT,
【机 构】
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深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院
【基金项目】
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深圳市科技创新委项目（JCYJ20160527172247868）；
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目的分离纯化α1抗胰蛋白酶（alpha 1-antitrypsin,AAT）,并评价其对C-BSA型大鼠肾炎模型的影响。方法以Cohn组分Ⅳ（Cohn frcationⅣ,FⅣ）为原料,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和S-200凝胶过滤柱层析纯化AAT,底物显色法检测其生物学活性。建立阳离子化小牛血清蛋白型大鼠肾炎模型,分别注射5.75和11.5 mg/kg的AAT,同时设正常组（未建模）,隔日经大鼠腹腔注射给药1次,连续注射4周,模型组和正常组注射等体积的PBS。检测各组大鼠的尿常规及24 h尿液总蛋白量,并对肾脏组织进行病理学检查,同时检测肾脏中IgG沉积及AAT、Desmin、Nephrin、Podocin的表达情况。结果纯化的AAT纯度为96%,浓度为11.85 mg/mL,活性回收率为47.67%,比活为5.37。与模型组比较,高剂量AAT组大鼠24 h尿蛋白量明显降低（P <0.05）,尿常规部分指标有所改善,肾小球体积增大程度有所减轻;高、低剂量AAT组大鼠肾小球IgG沉积均略减少（P> 0.05）,肾小球与肾小管AAT阳性表达量明显增加（P <0.001）,肾小球Desmin蛋白有减轻趋势,但差异无统计学意义（P> 0.05）;高剂量AAT组大鼠肾小球Nephrin及Podocin蛋白均明显增多（P <0.05）,低剂量AAT组略有升高趋势,但差异无统计学意义（P> 0.05）。结论本纯化工艺可获得纯度较高的AAT,其对大鼠肾炎具有一定提高疗效的作用。
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