【摘 要】
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目的:评估加味参芪地黄汤对人激素敏感型LNCaP细胞的影响及作用机制.方法:通过加味参芪地黄汤干预LNCaP细胞,采用MTT法检测细胞增值,流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用葡萄糖摄取试剂盒、乳酸比色测定试剂盒测定葡萄糖摄取量、乳酸生成量;采用Western印迹检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved-caspase-3,糖酵解相关蛋白HK2、GLUT1、PKM2和LDHA,以及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达情况;采用糖酵解诱导剂寡霉素,PI3K激活剂740 Y-P干预观察对加味
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院泌尿中心,上海201203
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目的:评估加味参芪地黄汤对人激素敏感型LNCaP细胞的影响及作用机制.方法:通过加味参芪地黄汤干预LNCaP细胞,采用MTT法检测细胞增值,流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用葡萄糖摄取试剂盒、乳酸比色测定试剂盒测定葡萄糖摄取量、乳酸生成量;采用Western印迹检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved-caspase-3,糖酵解相关蛋白HK2、GLUT1、PKM2和LDHA,以及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达情况;采用糖酵解诱导剂寡霉素,PI3K激活剂740 Y-P干预观察对加味参芪地黄汤作用的影响.结果:加味参芪地黄汤以剂量依赖方式抑制LNCaP细胞增值,并诱导其凋亡,同时上调Bax、cleaved-caspase 3水平,降低Bcl-2水平;加味参芪地黄汤能显著降低LNCaP细胞葡萄糖摄取量、乳酸生成量,并抑制HK2、GLUT1、PKM2和LDHA表达水平;加味参芪地黄汤能显著抑制AKT、PI3K和mTOR的磷酸化水平;寡霉素和740 Y-P能逆转加味参芪地黄汤对LNCaP细胞增值的抑制作用;740 Y-P能逆转加味参芪地黄汤对葡萄糖摄取量、乳酸生成量,和对糖酵解相关蛋白HK2、GLUT1、PKM2和LDH-A的抑制作用.结论:加味参芪地黄汤通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,抑制糖酵解,进而抑制LNCaP细胞增值.
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