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人工酵母染色体(YAC)可以克隆和分析大片段的染色体DNA，并且可以分离那些在大肠杆菌(Escherichia coli)中不可能得到的序列。实验将His5基因插入到一个Ura3基因的中间，构建了一个新的质粒pLRH33，从而打断了Ura3基因使之不能表达。利用His5基因两端各留下的部分Ura3基因片段，同源重组到YAC臂上原有的Ura3基因中，使重组后的YAC的标记性状从Rra^+His^-变成了His^+Ura^+。用质粒pLRH33的5．5kb线性片段以一定比例和需要重组到YAC上的目的基因pBA