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目的建立测定人血清广泛型线粒体肌酸激酶（uMtCK）浓度的双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。方法应用原核表达的uMtCK重组蛋白免疫小鼠获得7株单克隆抗体，采用棋盘格滴定法筛选出最佳双抗体组合，其中抗体19F11进行辣根过氧化物酶（HRP）标记作为检测抗体，抗体3C1作为俘获抗体，建立检测人uMtCK双抗体夹心ELISA方法，并进行方法学评价。同时采用该法检测50名健康体检者和85例肿瘤标志物[甲胎蛋白（AFP）或癌胚抗原（CEA）]阳性患者的血清。结果通过筛查获得配对抗体，建立检测人uMtCK的