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建立了用反相高效液相色谱法（HPLC）测定茶叶中咖啡因的方法。茶叶经预处理后,通过Diomonsil C18（2）5u色谱柱分离,以甲醇＋水混合溶液为流动相进行洗脱,于286nm波长下紫外检测,一次进样分析仅需4min,咖啡因在10～150ug/mL范围内的线性关系良好,在加标水平为20、30、50ug/mL时,被测物的回收率为97.9%～103.8%。