【摘 要】
:
目的:用T7噬菌体展示文库鉴定1株单克隆抗体(mAb)DBD02的特异性.方法:用Protein G Sepharose结合mAb后对T7噬菌体展示文库进行2轮生物淘洗,用洗脱的通过特异mAb富集的噬菌体
【机 构】
:
军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室,北京,100850北京蛋白组研究中心抗体工程研究室,北京,102206;军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室,北京,100850;北京蛋白组研
论文部分内容阅读
目的:用T7噬菌体展示文库鉴定1株单克隆抗体(mAb)DBD02的特异性.方法:用Protein G Sepharose结合mAb后对T7噬菌体展示文库进行2轮生物淘洗,用洗脱的通过特异mAb富集的噬菌体铺板后,以DBD02为一抗进行Dot blot筛选,阳性克隆进一步通过Western blot检测,PCR扩增阳性噬菌体插入的肝脏cDNA片段,测序后,通过BLAST比对确定mAb DBD02所识别的抗原.结果:在2轮淘洗后得到了>50个阳性克隆,取其中2个点扩增后进行了Western blot检测,并对这2个阳性克隆进行了PCR,序列测定后鉴定了此mAb所识别的抗原为乙醇脱氢酶,并将此mAb识别的表位限定于22个多肽内.结论:T7噬菌体展示文库可应用于mAb特异性的鉴定,与cDNA表达文库的免疫筛选相比,具有省时、省力和经济的特点,是mAb特异性鉴定的有力工具.
其他文献
刘彬的儿子刘瑞几天前又因哮喘发作入院了。这是他两年来第3次因哮喘病入院治疗,而刘瑞今年只有5岁。虽然经过医生治疗使症状缓解,但医生也告诉刘彬,你儿子的哮喘病目前难以得到根治,只有在日常生活中多加注意,控制其发病。 事实上,像刘瑞这样被哮喘病折磨的儿童并不在少数。从全球看,澳大利亚每4个儿童就有1个被确诊患有哮喘病,尤其是在墨尔本,5岁儿童的哮喘发病率从1960年的19%增加到1990年的46%:
毛泽东周恩来赞叹的伏波将军及其他安明上海《文汇报》1991年2月13日第8版载:60年代初,应非洲某国革命者的请求,中共中央、中央军委决定派一位中将去这个国家,履行国际主义义务,帮助那里的革
房山区位于北京的西南郊,交通便利,资源丰富,具有得天独厚的经济发展优势。但在计划经济下,地区封锁,受部门、村、镇利益的驱使,搞了许多“大而全”、“小而全”的小企业,重复建设、
儿童骨髓炎一般急性发病,也称血源性骨髓炎,多由于儿童干骺端血流丰富而且流速缓慢,使细菌更易在此处沉积,导致感染。儿童骨髓炎是由化脓性细菌经血行感染引起骨、骨髓的炎症
目的观察四氢孕酮对不同动物惊厥模型的保护作用。方法C57小鼠腹腔注射四氢孕酮15min后观察其对最大电休克实验(maximalelectricalseizure,MES)或印防己所致惊厥的保护作用。
目的:采用1H-NMR技术从多成分角度分析30批市售狗脊饮片的质量差异,建立狗脊饮片质量控制的新方法。方法:采用主成分分析和偏最小二乘法对600 MHz核磁谱仪测定的30批市售狗脊
应用HPLC反相色谱法对维生素B_6(VB_6)的三种不同同系物(吡哆醇、吡哆胺、吡哆醛)进行分离测定是一种新的VB_6测定法,经充分粉碎的样品,用0.1M硫酸溶液,在120℃下水解30分钟,
很少有这样的市场:她同时具备高度一致的政策敏感性和极端分散的采购决策;她一面强调产品流程的本土特殊性,一面积极渴望与国际标准接轨;她可以给投身其中的公司三位数的业绩
用电子自旋共振技术对自旋捕捉剂α-苯基-N-叔丁基氮氧化物(PBN)的两种常用合成方法进行了比较分析,并对方法进行了改进,提出了用 H_2O_2代替 C_6H_5COOOH 对缩合物 PhCH=NBu
海南作为经济特区,位于我国对外开放的前沿,在日益频繁的对外经济文化交往中树立自身的良好形象,至关重要。《江苏通讯》98年第3期发表的吴健民同志谈“第一印象”的文章,切