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目的 发展基于数字全息显微镜的人类精子三维动态行为的监测技术.方法 采自健康男性的精子样本分散于人工输卵管液(HTF)中,稀释到2×107/mL后显微制样;利用数字全息显微镜记录包含精子三维位置信息的全息图;平均每组全息图得到背景图;对全息图做背景扣除后,利用定位算法获取精子的实时三维坐标;利用轨迹连接算法将精子的三维坐标连接成三维轨迹;基于三维轨迹,发展算法获取精子的三维运动模式、密度的空间分布、三维速度的空间分布和三维朝向.结果 利用数字全息显微镜,获取了包括精子的三维运动模式及反映精子与表面相互作用的密度分布、三维速度的空间分布和三维朝向在内的多项与精子受精能力相关的信息.结论 数字全息显微镜为分析和评估精子的受精能力提供了更为全面的数据.