【摘 要】
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目的构建人MIIP蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及生物学活性鉴定。方法 RT-PCR扩增得到人MIIP基因全长编码序列,采用重组DNA技术将其克隆至
【机 构】
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宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室生物化学与分子生物学系,宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤内科
【基金项目】
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国家自然科学基金(81101601);宁夏自然科学基金(NZ11125);宁夏医科大学“博士学位建设学科”开放课题(KF2010-25)
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目的构建人MIIP蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及生物学活性鉴定。方法 RT-PCR扩增得到人MIIP基因全长编码序列,采用重组DNA技术将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建获得重组原核表达载体pGEX-4T-1-MIIP,经酶切鉴定及测序验证完全正确后,将其转化至大肠杆菌BL21细胞中,用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经纯化获得目的蛋白,用Western blot鉴定所得融合蛋白。结果构建了pGEX-4T-1-MIIP原核表达载体,在大肠杆
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