【摘 要】
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目的 探究Th17细胞/调节性T细胞(Treg)失衡在日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿形成中的作用。方法 采用6~8周龄的BALB/c小鼠建立日本血吸虫感染模型,在感染后第2、 4、 6、 8周处死小鼠,收集肝脾组织和血液。采用HE染色和Masson染色检测小鼠肝组织病变情况;流式细胞术检测肝、脾组织中Th17细胞、 Treg百分比变化;实时定量PCR检测肝组织中白细胞介素6(IL-6)、 IL-10、
【机 构】
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南华大学衡阳医学院病原生物学研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金(81101274);
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目的 探究Th17细胞/调节性T细胞(Treg)失衡在日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿形成中的作用。方法 采用6~8周龄的BALB/c小鼠建立日本血吸虫感染模型,在感染后第2、 4、 6、 8周处死小鼠,收集肝脾组织和血液。采用HE染色和Masson染色检测小鼠肝组织病变情况;流式细胞术检测肝、脾组织中Th17细胞、 Treg百分比变化;实时定量PCR检测肝组织中白细胞介素6(IL-6)、 IL-10、 IL-17、 IL-23和维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头盒转录因子P3(FOXP3)的mRNA水平;ELISA检测血清中IL-6、 IL-17、 IL-23和转化生长因子β(TGF-β)表达水平。制备日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SjSEA),体外刺激小鼠脾细胞,实时定量PCR检测不同时间点RORγt、 FOXP3的mRNA水平,ELISA检测培养上清液中IL-6、 IL-17、 IL-23、 TGF-β的水平。结果 血吸虫感染第4周开始,肝组织中出现炎性细胞浸润、虫卵肉芽肿形成和胶原蛋白沉积增加,感染时间越长,病变程度越严重。在肝、脾组织中,与正常对照组比较,Th17细胞百分数在感染后第2、 4、 6周显著性升高;Treg百分数在感染后第4、 6、 8周的小鼠肝组织中显著性升高,而在小鼠脾脏中则是在感染第2、 4周显著性升高。与正常对照组相比,在肝组织中,Th17细胞/Treg比值在感染组均明显降低;在脾组织中,Th17细胞/Treg比值在感染后第2、 4周明显降低,第6周出现升高。Th17细胞/Treg比例失衡在肝脏更为明显。感染小鼠肝组织和血清中相关的转录因子和细胞因子表达水平与Th17细胞和Treg的动态变化相吻合。SjSEA刺激小鼠脾细胞能够诱导Th17细胞的分化以及相关细胞因子和转录因子的表达。结论 Th17细胞在血吸虫病的肝组织病理损伤中可能起主要作用,Th17细胞/Treg比例失衡与日本血吸虫肝虫卵肉芽肿反应和纤维化的形成密切相关。
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