简并引物法克隆保加利亚乳杆菌β-N-乙酰氨基己糖苷酶基因

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β-N-乙酰氨基己糖苷酶(β-Hexcase)在细菌、植物和动物中广泛存在,具有典型的外切酶活性并可以催化切除β-N-乙酰氨基己糖的非还原性氨基己糖残基,在细菌细胞分裂中具有重要作用.选取与保加利亚乳杆菌LJJ亲缘关系近的菌种的β-N-乙酰氨基己糖苷酶蛋白序列,利用ICO—DEHOP和CODEHOP在线简并引物设计软件设计β-Hexcase简并引物,选取Hexl-f和Hexl—r引物对,以LJJ基因组DNA为模板经PCR扩增得到614bp产物.PCR产物连接pGEM—T质粒载体后克隆至大肠杆菌DH5仪中,
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