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弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子的克隆及鉴定

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：monorrch

【摘 要】

：

目的克隆弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子并进行初步鉴定。方法PCR扩增出LDH2基因5’侧翼序列系列截短突变体，定向插入载体pTX3-basic的KpnI／XholI酶切位点之间，转化大肠埃希菌T

【作 者】

：

张加勤 侯香华 宋秀宇 

【机 构】

：

厦门大学附属第一医院检验科

【出 处】

：

中国人兽共患病学报

【发表日期】

：

2013年4期

【关键词】

：

弓形虫 乳酸脱氢酶 启动子 荧光素酶 Toxoplasma gondii  LDH2  promoter  luciferase 

【基金项目】

：

国家自然科学基金（No.81000762）,福建省自然科学基金（No.2010D018）,福建省卫生厅青年基金（No.2010-2-90）

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目的克隆弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子并进行初步鉴定。方法PCR扩增出LDH2基因5’侧翼序列系列截短突变体，定向插入载体pTX3-basic的KpnI／XholI酶切位点之间，转化大肠埃希菌Top10，氨苄西林筛选，建立重组LDH2基因5’侧翼序列系列截短突变体荧光素酶表达载体。转染刚地弓形虫速殖子，利用荧光素酶检测试剂盒测定所克隆片段的启动转录活性。结果成功扩增出LDH2基因5’侧翼序列系列突变体；系列重组荧光素酶表达质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确无误；系列重组荧光素酶表达质粒在弓形虫速殖子中的

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