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试验通过对适合副猪嗜血杆菌生长的4种固体培养基（巧克力琼脂、1%NAD巧克力琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂和1%NAD胰蛋白胨大豆琼脂）筛选,采用分光光度计即时测定细菌数量,并以Bliss-LD50软件计算副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）对昆明小鼠的半数致死量。结果HPS在0.1%NAD的巧克力琼脂培养基生长最佳,以16～18h对数生长期细菌OD600值计算活菌量较准,HPS对昆明小鼠LD50为3.4291×109。