【摘 要】
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采用碱裂解法、改良碱裂解法、大质粒简易提取法、试剂盒法和SDS法共5种方法对分离于绵阳市奶牛场的乳腺炎病原菌共50株进行了质粒DNA的提取,并用琼脂糖凝胶电泳对提取质粒进
【机 构】
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绵阳师范学院动物应用技术研究所分子生物学与生物制药重点实验室,成都中医药大学药学院,西南民族大学生命科学与技术学院
【基金项目】
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四川省教育厅自然科学重点课题(2005A178)
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采用碱裂解法、改良碱裂解法、大质粒简易提取法、试剂盒法和SDS法共5种方法对分离于绵阳市奶牛场的乳腺炎病原菌共50株进行了质粒DNA的提取,并用琼脂糖凝胶电泳对提取质粒进行了电泳分析。结果表明,5种质粒提取方法中SDS法的提取率较高(88%),电泳检测时质粒条带清晰,绝大部分菌株含有大小约20 kb的一种质粒;其他4种方法的提取率都较低,且以弥散性质粒条带为主。以提取的质粒DNA为模板,对其四环素耐药基因tetM、tetK和tetC进行了PCR扩增。结果表明,仅4株扩增出了tetM基因的特异性产物,未能扩增出tetK基因和tetC基因。
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