扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：windtree

【摘要】

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利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶（VEL）基因进行体外定点突变，并将含突变基因的重组质粒pA0815-ep8-R182K在毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115中进行表达。叠加突变体PEL-ep8-

【作者】

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王彩梅蔡少丽吴义真林琳

【机构】

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福建师范大学生命科学学院

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2007年4期

【关键词】

：

扩展青霉脂肪酶叠加突变最适温度热稳定性 Penicillium expansum lipase Double-Mutagenesis Optimum te

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（No.30270033）,福建省自然科学基金资助项目（No.B0120001和C0410009）,福建省工业微生物研发平台建（2006H0085）目资助

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利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶（VEL）基因进行体外定点突变，并将含突变基因的重组质粒pA0815-ep8-R182K在毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115中进行表达。叠加突变体PEL-ep8-R182K表达产物与野生型PEL、PEL-ep8比较实验表明：叠加突变体表达蛋白PEL-ep8-R182K最适反应温度与野生型PEL、PEL-ep8一致，均为40℃；热稳定性与野生型相似，比PEL-ep8降低2．25℃。但是，在比活上，PEL-ep8-R182K与PEL-ep8、野生型PE

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