【摘 要】
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目的:阐述雌二醇(E2)作用于膀胱癌的潜在分子通路。方法:实时定量PCR(qRT–PCR)法检测膀胱癌及癌旁组织中雌激素应答基因–雌激素受体生长调节结合蛋白1(GREB1)的表达水平。
【机 构】
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安徽医科大学附属深圳二院临床学院;
【基金项目】
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国家重点基础研究计划(973计划)项目资助课题(2014CB745201)
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目的:阐述雌二醇(E2)作用于膀胱癌的潜在分子通路。方法:实时定量PCR(qRT–PCR)法检测膀胱癌及癌旁组织中雌激素应答基因–雌激素受体生长调节结合蛋白1(GREB1)的表达水平。采用CRISPR–Cas13a系统敲低其对应的增强子RNA(eGREB1),通过qRT–PCR法验证eGREB1与GREB1基因表达的关系。运用CRISPR–Cas9系统敲低GREB1,qRT–PCR法检测其在膀胱癌细胞T24和5637的敲低效率,采用CCK–8实验检测GREB1敲低后E2诱导的细胞增殖能力的变化,划痕实验检测GREB1敲低后E2诱导的细胞迁移能力变化,Transwell实验检测GREB1敲低后E2诱导的细胞侵袭能力变化,人胱天蛋白酶3(Caspase–3)实验用于检测GREB1敲低后E2诱导的细胞凋亡能力的变化。结果:qRT–PCR显示相较于癌旁组织,GREB1基因在膀胱癌中表达升高,差异具有统计学意义(P <0.05);eGREB1与GREB1表达水平呈正相关。GREB1基因表达下调后,E2诱导的细胞增殖、迁移及侵袭能力明显下降,细胞凋亡增加,差异均具有统计学意义(P <0.05)。结论:E2可能通过诱导eGREB1的产生来调控GREB1的表达,从而促进膀胱癌的发生发展,该分子通路可作为膀胱癌预防和治疗的潜在靶点。
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