【摘 要】
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[目的]探讨EZH2-miR-139-5p通路在大肠癌中的表达及对化疗耐药性的影响.[方法]选取54例大肠癌患者癌组织及癌旁组织,比较癌组织和癌旁组织EZH2及miR-139-5p mRNA水平,并分析
【机 构】
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河北北方学院附属第一医院,河北张家口 075000
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[目的]探讨EZH2-miR-139-5p通路在大肠癌中的表达及对化疗耐药性的影响.[方法]选取54例大肠癌患者癌组织及癌旁组织,比较癌组织和癌旁组织EZH2及miR-139-5p mRNA水平,并分析大肠癌组织中EZH2 mRNA与miR-139-5p mRNA水平的相关性.选取6种大肠癌细胞株(LOVO、RKO、HCT116、LS174t、HT29、SW480),采用 Western blot法及RT-PCR法分析各细胞株EZH2蛋白及miR-139-5p mRNA相对表达量.向LOVO细胞株转染siRNA-EZH2后检测miR-139-5p相对表达量,再向SW480细胞株转染EZH2质粒后检测miR-139-5p相对表达量.通过在HCT116细胞内转染miR-139-5p类似物及阴性对照物24h后,加入不同浓度(0、0.465、3.720、29.800、238.000、1904.000μM)奥沙利铂,加药48h后采用CCK8法检测细胞活性.[结果]相较于癌旁组织,大肠癌组织EZH2 mRNA水平更高(P＜0.05),而miR-139-5p mRNA水平更低(P＜0.05),且大肠癌组织中,EZH2 mR-NA与miR-139-5p mRNA水平呈负相关(r=-0.334,P＜0.05).在高侵袭力细胞株(LOVO、RKO、HCT116)中,EZH2蛋白相对表达量较低,而miR-139-5p mRNA水平较高;在低侵袭力细胞株(LS174t、HT29、SW480)中EZH2蛋白相对表达量较高,而miR-139-5p mRNA水平较低.转染siRNA-EZH2的细胞中,miR-139-5p mRNA相对表达量有所上升;转染EZH2质粒的细胞中,miR-139-5p mRNA相对表达量有所下降.在HCT116细胞中转染miR-139-5p类似物48h后,细胞活性随药物浓度有所降低,且降低程度比阴性对照显著.[结论]MiR-139-5p参与大肠癌化疗药物的耐药机制,并可能通过调控靶基因EZH2从而抑制大肠癌细胞的增殖.
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