骨形态发生蛋白基因真核表达质粒的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达

来源 :广州中医药大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huayong_
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【目的】克隆人骨形态发生蛋白(BMP4)基因,构建真核表达质粒,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达,为进一步研究以BMP4进行骨修复的基因治疗奠定基础。【方法】采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,从人的松质骨中扩增BMP4的环形脱氧核糖核酸(cDNA),插入pGEM-Teasy载体,测序证实后,将其亚克隆至质粒PCDNA3.1B(-)中构建BMP4真核表达载体;采用脂质体将重组质粒转染CHO细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆.以RT-PCR和免疫组织化学方法鉴定转染细胞中BMP4基因的表达。【结
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