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目的 探讨急性砷暴露条件下,小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)中长型NF-E2相关因子1(Nrf1)缺失对同家族成员NF-E2相关因子2(Nrf2)及其下游基因表达的影响.方法 提取4周龄雄性小鼠BM-MSCs,利用慢病毒转染系统构建长型Nrf1低表达(L-Nrf1-KD)的细胞模型.将BM-MSCs按是否包含L-Nrf1分为对照(Scramble细胞)组和L-Nrf1-KD组.将Scramble细胞和L-Nrf1-KD细胞按照暴露于5μmol/L亚砷酸钠的时间各分为6组,即Scramble细胞暴露0h组(对照组)、Scramble细胞暴露2h组、Scramble细胞暴露6h组、Scramble细胞暴露12h组、Scramble细胞暴露18h组、Scramble细胞暴露24 h组,L-Nrf1-KD细胞暴露0h组(对照组),L-Nrf1-KD细胞暴露2h组,L-Nrf1-KD细胞暴露6h组,L-Nrf1-KD细胞暴露12h组,L-Nrf1-KD细胞暴露18h组以及L-Nrf1-KD细胞暴露24 h组,每组各3个样品.采用RT-qPCR法检测Nrf2、Gclc、Gclm和Hmox1的mRNA表达水平.采用Western blot法检测细胞NRF2的蛋白表达水平.结果 与对照相比,L-Nrf1沉默的细胞中Nrf2的蛋白和mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照相比,L-Nrf1-KD细胞中Hmox1和Gclc的mRNA表达水平较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);而Gclm的mRNA表达水平无明显变化.与0h相比,5μmol/L亚砷酸钠暴露Scramble和L-Nrf1-KD细胞不同时间后Nrf2的mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着暴露时间的延长,Scramble和L-Nrf1-KD细胞Nrf2的mRNA表达水平均呈先升高后下降趋势,并在12h时最高.与对照相比,5μmol/L亚砷酸钠暴露L-Nrf1-KD细胞不同时间后Nrf2的mRNA表达水平均较低,除6h(较高,P＜0.05)和12 h(P＞0.05)外,差异均有统计学意义(P＜0.05).与0h相比,5μmol/L亚砷酸钠暴露Scramble和L-Nrf1-KD细胞不同时间后NRF2蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着暴露时间的延长,Scramble和L-Nrf1-KD细胞NRF2的蛋白表达水平均呈先升高后下降趋势,并分别在18、12h时最高.与对照相比,5 μmol/L亚砷酸钠暴露L-Nrf1-KD细胞不同时间后NRF2蛋白表达水平均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与0 h相比,5 μmol/L亚砷酸钠暴露Scramble和L-Nrf1-KD细胞不同时间后Gclc、Gclm、Hmox1的mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着暴露时间的延长,Scramble和L-Nrf1-KD细胞mRNA表达水平均呈先升高后下降趋势,并均在12h时最高.与对照相比,5μmol/L亚砷酸钠暴露L-Nrf1-KD细胞0和12 h后的Gclc以及0h的Hmox1的mRNA表达水平均较高,而24 h后的Gclc和2、12、18、24h后的Gclm及24h后的Hmox1的mRNA表达水平均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在本实验条件下,BM-MSCs内L-Nrf1缺失导致Nrf2及其下游基因表达抑制.