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摘 要：建立气相色谱法测定复方丹参片中冰片的含量及含量均匀度。方法：以萘为内标物，以聚乙二醇（PEG）-20M为固定液，涂布浓度为10%，柱长2m，柱温为120摄氏度，汽化250摄氏度，载气（N2）流速为50mL·min-1，氢气45mL·min-1，空气450mL·min-1。冰片在0.05～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。冰片平均回收率分别为99.2%。结论：本法简便、准确，可用于冰片的含量测定。
关键词：复方丹参片；含量；测定
复方丹参片具有活血化瘀，理气止痛的功效。复方丹参片常用于气滞血瘀所致的胸痹，症见胸闷、心前区刺痛；冠心病心绞痛见上述症侯者。现在药理研究表明复方丹参片具有可改善心脑血管急性症状和心电图缺血性的改变；扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量，减慢心率，改善心肌缺氧之功效；可抑制血小板凝集，抑制血小板的释放反应，降低血粘度，降低血脂。冰片其他名称为龙脑、龙脑香、脑子、冰片、片脑、冰片脑、梅花脑、天然冰片等。冰片为从龙脑香的树脂和挥发油中取得的结晶，是近乎纯粹的右旋龙脑。冰片具有通诸窍，散郁火，去翳明目，消肿止痛的功效。《医林纂要》记载：“冰片主散郁火，能透骨热，治惊痫、痰迷、喉痹，舌胀、牙痛、耳聋、鼻息、目赤浮翳、痘毒内陷、杀虫、痔疮、催生，性走而不守，亦能生肌止痛。然散而易竭，是终归阴寒也。”冰片具有镇痛、抗炎的作用[1-2]。本文采用气相色谱法对复方丹参片中的冰片进行了含量及含量均匀度测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器：中亚SPGH-300高纯氢气发生器（北京桑翌实验仪器研究所）；GA-2000A低噪音空气泵（GA-2000A低噪音空气泵）；中亚 SPGN-2A氮气发生器（北京桑翌实验仪器研究所）； GC-6890A型气相色谱仪（北京中科惠分仪器有限公司）；奥豪斯Explorer专业型分析天平（奥豪斯仪器上海有限公司）；北分三谱DK-6900A型自动顶空进样器（北京北分三谱仪器有限责任公司）；RE-52A实验室旋转蒸发器（上海比朗仪器有限公司）；XSYF-D实验室废水处理设备（北京湘顺源科技有限公司）；WH-8SN旋片式真空泵（北京桑翌实验仪器研究所）；BL10-250C双频加热型超声波清洗器（天津市恒奥科技发展有限公司）；中亚 WYB-Ⅱ静音无油空气发生器（北京桑翌实验仪器研究所）。
1.2 色谱柱：聚乙二醇（PEG）-20M为固定液，涂布浓度为10%，柱长2m。
1.3 对照品：冰片对照品（中国药品生物制品检定所）。
1.4 试剂：水为纯化水，醋酸乙酯（上海安谱科学仪器有限公司）。
1.5 试药：复方丹参片。
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[3-5]。以萘为内标物，以聚乙二醇（PEG）-20M为固定液，涂布浓度为10%，柱长2m，柱温为120摄氏度，汽化250摄氏度，载气（N2）流速为50mL·min-1，氢气45mL·min-1，空气450mL·min-1。
2.2 对照品的制备
2.2.1 内标溶液的配制
取萘，加醋酸乙酯溶解并定容至刻度，摇匀，制成6mg·mL-1的溶液。
2.2.2 对照品溶液的制备
精密称取冰片对照品40.0mg至于10毫升棕色容量瓶中，加醋酸乙酯震荡溶解，加醋酸乙酯定容，摇匀。
2.2.3 校正因子的測定 取冰片对照品约6mg，精密称定，置5mL量瓶中，精密加入内标溶液1mL，用醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，取1μL注入气相色谱仪，计算校正因子。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取复方丹参片，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入醋酸乙酯20ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用醋酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液6ml，加2毫升内标溶液，加醋酸乙酯定容，摇匀，即得。
2.4 专属性试验
依照处方取丹参 、三七，按样品制备工艺制成阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在冰片出峰处阴性液无色谱峰，表明本方法专属性良好。
2.5 对照品的线性考察
按对照品溶液的制备方法分别配制0.1mg·mL-1、0.2mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.8mg·mL-1、1.6mg·mL-1、3.2mg·mL-1、6.4mg·mL-1的对照品溶液。分别精密吸取2毫升，各精密加入内标溶液2毫升。取上述溶液，分别精密上述溶液吸取1μL，注人气相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以冰片与内标峰面积比值（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。冰片的总峰面积（龙脑峰与异龙脑峰面积之和）与内标物萘峰面积之比（Y）与相应浓度之比（X）的线性回归方程，结果表明，冰片在0.05～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6 重现性试验
称取同一批的冰片样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.95%，结果表明此方法的重现性良好。
2.7 准确度试验
取对照品适量，加入到样品中，加入量分别相当于样品含量的80%、100%、120%。取模拟片照“含量测定”项下方法试验，计算回收率为99.2%，RSD为0.86%。
2.8 样品稳定性试验
取同一批冰片样品，按2.3项下的供试品制备方法制备供试品，将供试品置棕色容量瓶室温下放置，分别于0、1、2、4h进样4次，计算冰片的总峰面积（龙脑峰与异龙脑峰面积之和）与内标峰面积之比的RSD为0.83%（n=4）。结果表明溶液在4h内稳定性良好。
2.9 样品均匀度测定
依照上述含量测定方法，取10个样品来进行含量均匀度测试，结果表明样品含量均匀度符合要求。
3 讨论
本实验表明此方法分离效果好、方法简便、快捷、准确，、专属性好，可用于复方丹参片中冰片的含量测定。样品含量均匀度符合要求。
参考文献
[1]陈新梅，朱家壁，孙卫东，张立建.冰片对人参皂苷Rg1鼻腔吸收的促进作用及鼻腔纤毛毒性研究[J].中国药学杂志，2006（04）.
[2]黄天来，叶少梅，欧卫平，宓穗卿.单剂量冰片及单剂量复方制剂中冰片的药物动力学比较研究[J].中药新药与临床药理，2006（04）.
[3]阎正，刘树彬，葛旭升，梁增池，黄平侠，冯天铸，周文英.毛细管气相色谱法快速测定中成药橡胶膏剂中樟脑、薄荷脑、冰片含量[J].河北大学学报（自然科学版），2001（03）.
[4]罗兴平，王兰霞，张伯崇，高天兵，鲁静，林瑞超.气相色谱法测定强力救心滴丸中冰片的含量[J].药物分析杂志，2002（01）.
[5]张赟，马玲玲，王剑，安佃云，沈腾，王建新.散结止痛巴布膏中冰片加入工艺的研究及冰片含量测定[J].中国临床药学杂志，2014（03）.
关键词：复方丹参片；含量；测定
复方丹参片具有活血化瘀，理气止痛的功效。复方丹参片常用于气滞血瘀所致的胸痹，症见胸闷、心前区刺痛；冠心病心绞痛见上述症侯者。现在药理研究表明复方丹参片具有可改善心脑血管急性症状和心电图缺血性的改变；扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量，减慢心率，改善心肌缺氧之功效；可抑制血小板凝集，抑制血小板的释放反应，降低血粘度，降低血脂。冰片其他名称为龙脑、龙脑香、脑子、冰片、片脑、冰片脑、梅花脑、天然冰片等。冰片为从龙脑香的树脂和挥发油中取得的结晶，是近乎纯粹的右旋龙脑。冰片具有通诸窍，散郁火，去翳明目，消肿止痛的功效。《医林纂要》记载：“冰片主散郁火，能透骨热，治惊痫、痰迷、喉痹，舌胀、牙痛、耳聋、鼻息、目赤浮翳、痘毒内陷、杀虫、痔疮、催生，性走而不守，亦能生肌止痛。然散而易竭，是终归阴寒也。”冰片具有镇痛、抗炎的作用[1-2]。本文采用气相色谱法对复方丹参片中的冰片进行了含量及含量均匀度测定。
1 仪器与试药
1.1 仪器：中亚SPGH-300高纯氢气发生器（北京桑翌实验仪器研究所）；GA-2000A低噪音空气泵（GA-2000A低噪音空气泵）；中亚 SPGN-2A氮气发生器（北京桑翌实验仪器研究所）； GC-6890A型气相色谱仪（北京中科惠分仪器有限公司）；奥豪斯Explorer专业型分析天平（奥豪斯仪器上海有限公司）；北分三谱DK-6900A型自动顶空进样器（北京北分三谱仪器有限责任公司）；RE-52A实验室旋转蒸发器（上海比朗仪器有限公司）；XSYF-D实验室废水处理设备（北京湘顺源科技有限公司）；WH-8SN旋片式真空泵（北京桑翌实验仪器研究所）；BL10-250C双频加热型超声波清洗器（天津市恒奥科技发展有限公司）；中亚 WYB-Ⅱ静音无油空气发生器（北京桑翌实验仪器研究所）。
1.2 色谱柱：聚乙二醇（PEG）-20M为固定液，涂布浓度为10%，柱长2m。
1.3 对照品：冰片对照品（中国药品生物制品检定所）。
1.4 试剂：水为纯化水，醋酸乙酯（上海安谱科学仪器有限公司）。
1.5 试药：复方丹参片。
2 测定方法确定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[3-5]。以萘为内标物，以聚乙二醇（PEG）-20M为固定液，涂布浓度为10%，柱长2m，柱温为120摄氏度，汽化250摄氏度，载气（N2）流速为50mL·min-1，氢气45mL·min-1，空气450mL·min-1。
2.2 对照品的制备
2.2.1 内标溶液的配制
取萘，加醋酸乙酯溶解并定容至刻度，摇匀，制成6mg·mL-1的溶液。
2.2.2 对照品溶液的制备
精密称取冰片对照品40.0mg至于10毫升棕色容量瓶中，加醋酸乙酯震荡溶解，加醋酸乙酯定容，摇匀。
2.2.3 校正因子的測定 取冰片对照品约6mg，精密称定，置5mL量瓶中，精密加入内标溶液1mL，用醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇匀，取1μL注入气相色谱仪，计算校正因子。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取复方丹参片，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入醋酸乙酯20ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用醋酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液6ml，加2毫升内标溶液，加醋酸乙酯定容，摇匀，即得。
2.4 专属性试验
依照处方取丹参 、三七，按样品制备工艺制成阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在冰片出峰处阴性液无色谱峰，表明本方法专属性良好。
2.5 对照品的线性考察
按对照品溶液的制备方法分别配制0.1mg·mL-1、0.2mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.8mg·mL-1、1.6mg·mL-1、3.2mg·mL-1、6.4mg·mL-1的对照品溶液。分别精密吸取2毫升，各精密加入内标溶液2毫升。取上述溶液，分别精密上述溶液吸取1μL，注人气相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以冰片与内标峰面积比值（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。冰片的总峰面积（龙脑峰与异龙脑峰面积之和）与内标物萘峰面积之比（Y）与相应浓度之比（X）的线性回归方程，结果表明，冰片在0.05～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6 重现性试验
称取同一批的冰片样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.95%，结果表明此方法的重现性良好。
2.7 准确度试验
取对照品适量，加入到样品中，加入量分别相当于样品含量的80%、100%、120%。取模拟片照“含量测定”项下方法试验，计算回收率为99.2%，RSD为0.86%。
2.8 样品稳定性试验
取同一批冰片样品，按2.3项下的供试品制备方法制备供试品，将供试品置棕色容量瓶室温下放置，分别于0、1、2、4h进样4次，计算冰片的总峰面积（龙脑峰与异龙脑峰面积之和）与内标峰面积之比的RSD为0.83%（n=4）。结果表明溶液在4h内稳定性良好。
2.9 样品均匀度测定
依照上述含量测定方法，取10个样品来进行含量均匀度测试，结果表明样品含量均匀度符合要求。
3 讨论
本实验表明此方法分离效果好、方法简便、快捷、准确，、专属性好，可用于复方丹参片中冰片的含量测定。样品含量均匀度符合要求。
参考文献
[1]陈新梅，朱家壁，孙卫东，张立建.冰片对人参皂苷Rg1鼻腔吸收的促进作用及鼻腔纤毛毒性研究[J].中国药学杂志，2006（04）.
[2]黄天来，叶少梅，欧卫平，宓穗卿.单剂量冰片及单剂量复方制剂中冰片的药物动力学比较研究[J].中药新药与临床药理，2006（04）.
[3]阎正，刘树彬，葛旭升，梁增池，黄平侠，冯天铸，周文英.毛细管气相色谱法快速测定中成药橡胶膏剂中樟脑、薄荷脑、冰片含量[J].河北大学学报（自然科学版），2001（03）.
[4]罗兴平，王兰霞，张伯崇，高天兵，鲁静，林瑞超.气相色谱法测定强力救心滴丸中冰片的含量[J].药物分析杂志，2002（01）.
[5]张赟，马玲玲，王剑，安佃云，沈腾，王建新.散结止痛巴布膏中冰片加入工艺的研究及冰片含量测定[J].中国临床药学杂志，2014（03）.