【摘 要】
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目的构建高效表达菌株,以大量表达大肠杆菌T蛋白的预苯酸脱氢酶(PDH),为研究T蛋白双功能结构域CM和PDH的相互协同作用以及T蛋白抑制剂对其影响提供活性蛋白材料.方法利用pGEX
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目的构建高效表达菌株,以大量表达大肠杆菌T蛋白的预苯酸脱氢酶(PDH),为研究T蛋白双功能结构域CM和PDH的相互协同作用以及T蛋白抑制剂对其影响提供活性蛋白材料.方法利用pGEX高效融合表达系统将PDH与谷光甘肽疏基转移酶(GST)编码序列在表达宿主BL21实现高效表达,并利用对GST具有亲和作用的Glutathione Sepharose4B琼脂糖珠进行亲和层析以对其分离纯化.结果表达产物达菌体总蛋白的40％,可溶性目的产物得量为240 mg·L-1,利用亲和层析法纯化后纯度达92.5％,G
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