人外周血树突状细胞的体外诱导和鉴定

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目的 :建立从人外周血体外诱导扩增树突状细胞 (DC)的方法。方法 :从正常人外周血白细胞分离单个核细胞 ,经三种细胞因子———重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)、重组人白细胞介素 4 (rhIL 4 )和重组人肿瘤坏死因子 (rhTNFα)联合诱导培养 ,10天后收获细胞 ,利用光学显微镜、透射电镜观察其外部形态和细胞超微结构 ,流式细胞仪检测其细胞表面抗原 ,自体混合淋巴细胞反应检测其刺激T细胞的增殖活性。结果 :培养收获了高纯度的DC ,这些细胞表面有大量的不规则突起 ,核也呈不规则状 ,核仁小 ,核膜异染色质聚集 ,含有丰富的细胞器 ,如核糖体、内质网、溶酶体等 ;细胞表面高水平表达HLA DR、CD1α、CD80、CD83和CD86 ;自体混合淋巴细胞反应表明诱导所得的DC具有很强的激发同种T细胞增殖的能力。结论 :人外周血单个核细胞经细胞因子诱导培养可以得到大量的成熟DC
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