双酚A单克隆抗体的制备

来源 :齐鲁工业大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinfeiyangfang
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以双酚酸为起始原料,通过3碳间隔臂联接牛血清白蛋白(BSA),制备了双酚A(BPA)人工抗原1:BPA-C3-BSA。以双酚A为起始原料,在其中一个酚羟基位置通过4碳间隔臂联接BSA,制备了BPA人工抗原2:BPA-C4-BSA。分别将这两种抗原免疫Balb/C小鼠,经克隆、亚克隆后获得稳定分泌细胞株BPA1-6E3和BPA2-4C7。对细胞上清液中的抗体进行鉴定,两株细胞所分泌抗体对BPA的IC50值分别为43.76 ng/mL和3.56 ng/mL。进一步鉴定4C7的IgG亚型为IgG1,轻链亚型为κ,抗体亲和常数为6.2×10~9。抗体与双酚酸的交叉反应率为4.9%,与双酚B的交叉反应率小于0.36%。初步实验表明,该抗体与BPA人工抗原2配对,可用于开发BPA酶联免疫试剂盒。
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